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水產養殖論文優選九篇

時間:2023-03-22 17:42:34

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水產養殖論文

第1篇

1.1光譜噪聲去除由于實驗條件如光譜儀硬件和環境光等因素影響,采集的原始光譜數據會包含噪聲,需要采用光譜預處理的方法把這些噪聲去除,同時保留有用光譜信息。采用SG平滑算法,經驗模態分解(empiricalmodedecomposition,EMD)算法和小波分析(wavelettransform,WT)去噪算法等對光譜進行處理,并對三種去噪算法進行比較。

1.2潛在變量(LatentVariable,LV)在利用PLS方法建立模型時,非常關鍵的一點是所選取的對于建模最優的LV個數,LV和主成分分析中主成分類似,第一個LV貢獻率最大,第二個次之,以此類推。如果選取的LV個數偏少,則無法全面代表樣本的光譜特性,造成模型精度下降,影響模型的預測效果。而如果選取的LV個數過多,則會帶入模型的噪聲,干擾建模效果。

1.3建模分析方法用三種建模方法,分別是偏最小二乘回歸(partialleastsquares,PLS),BP神經網絡(backpropagationneuralnet-work,BPNN)和偏最小二乘支持向量機(leastsquaresupportvectormachine,LS-SVM)。采用PLS建模方法時,基于全譜作為模型輸入,使用BP神經網絡和LS-SVM建模時,把PLS回歸模型得到的LV作為輸入,進行對比分析。神經網絡由一個輸入層、一個或多個隱含層和一個輸出層構成。BP神經網絡是一種非線性的建模方法,廣泛應用于光譜建模分析中[12]。LS-SVM是在經典支持向量機算法基礎上作了進一步改進,能夠同時進行線性和非線性建模分析,是解決多元建模的一種快速方法。

1.4定量模型評價標準定量模型的評價指標主要有決定系數和均方根誤差(rootmeansquareerror,RMSE)。建模集決定系數用R2表示,預測集決定系數用r2表示。決定系數越接近于1,表示模型相關性越好,預測效果更好。一般來說,RMSE越小說明模型的誤差越小,模型精度越高。建模集均方根誤差用RMSEC表示,預測集均方根誤差RMSEP表示。

2結果和討論

2.1UV/Vis光譜圖及COD濃度的統計分析圖1為甲魚養殖水樣本的UV/Vis原始光譜曲線,從圖中可以看出各個水樣的光譜曲線的趨勢相類似,沒有呈現顯著性差異,由于水體中硝酸鹽、有機酸、腐殖質等物質對紫外光的強烈吸收,在波段200~260nm區域的吸收度明顯高于其他區域。試驗水體樣本COD值統計結果如表1所示,模型的建模集和預測集COD值覆蓋了較大范圍,有助于建立準確、穩定和具有代表性的模型。

2.2基于全波長的PLS模型為了更好的分析三種消噪算法檢測水體COD含量的性能,將對不同預處理方法獲取的評價指標相比較,基于全譜的PLS模型的計算結果如表2所示。由表2可知,小波算法去除噪聲后的光譜PLS模型取得了最佳結果,建模集的R2為0.79,RMSEC為15.89mg•L-1,預測集的r2為0.78,RMSEP為15.92mg•L-1。SG平滑和EMD算法雖然部分去除了噪聲,但建模效果并沒有得到相應提高。故后面建模分析在WT分析基礎上進行。

2.3LV一般選取最優LV個數的標準觀察RMSEP值隨LV個數變化情況,如圖3所示,當LV個數較少時,RMSEP值較大,隨著LV個數的增加,RMSEP隨之減小,當LV個數增加到6時,RMSEP的值保持穩定,LV個數繼續增加,RM-SEP值也沒有隨著增加。取前6個LVs作為偏最小二乘支持向量積的輸入建立模型。從貢獻率角度解釋,PLS建模得到的6個LVs分別作為LS-SVM的輸入,之所以取前6個是因為這樣幾乎可以100%表達原始光譜有用信息,如表3所示,且降低了模型復雜度,提高模型運行速度和精度。

2.4BP神經網絡模型根據前文得到的結果,將表3中選出的LVs作為BP神經網絡模型輸入,BP神經網絡模型的計算結果如表4所示。分析表4可知,將6個LVs作為LS-SVM模型輸入的結果,其建模集的R2為0.82,RMSEC為15.77mg•L-1,預測集的r2為0.81,RMSEP為16.67mg•L-1。

2.5基于LVs輸入的LS-SVM模型LS-SVM模型預測結果如表5所示。采用LVs作為LSSVM模型輸入,得到的結果優于基于BP神經網絡模型。其建模集的R2為0.83,RMSEC為14.78mg•L-1,預測集的r2為0.82,RMSEP為14.82mg•L-1。

2.6PLS,BP神經網絡和LS-SVM模型比較PLS,BPNN和LS-SVM建模方法的結果比較如圖3所示,Cal表示模型的建模集(calibration),Pre表示模型的預測集(prediction)。不難發現,在LS-SVM模型和BP神經網絡模型中,基于LV作為模型輸入-建立的LS-SVM模型取得了最優的效果,BP神經網絡模型的預測效果較優,且LS-SVM模型和BP神經網絡模型都優于全波長的PLS模型結果。

3結語

第2篇

1.選擇本市各轄區10個池塘循環水養殖單位,主養面積5874畝,凈化區面積540畝,主養品種分別為河蟹、青蝦、翹嘴鲌、銀鯽、青魚、草魚等。凈化區分為池塘、溝渠兩種類型,分別種植浮萍、水花生、空心菜、菖蒲、美人蕉、蘆葦、輪葉黑藻等浮水、挺水、沉水類水生植物。根據包含的水生植物種類的差異,細分為單一型(單一類型)、雙組型(兩種類型)和復合型(三種類型),根據種植密度的差異,按30%以下、30%~70%、70%以上密度劃分。凈化區除種植水生植物外,還放養一定量的鰱鳙魚、黃尾鲴、螺蚌等水生動物。

2.選擇長蕩湖網圍養殖戶3個,養殖面積55畝,主養河蟹,套養鰱鳙魚、黃尾鲴、螺等,種植浮萍等水生植物。

3.主養品種放養規格、密度、餌料投喂、疾病防控、增氧換水、養殖管理等均按各自模式不變。

4.在8月初持續高溫季節,對池塘循環水凈化區凈水口與網圍養殖區進行抽樣,委托檢測機構檢測pH、化學需氧量、氨氮、總磷、總氮、亞硝酸鹽等指標。

5.在9月初,對池塘循環水養殖單位、長蕩湖網圍養殖戶及其周邊養殖單位(戶)高溫損失情況進行統計;在11月,對池塘循環水養殖單位和長蕩湖網圍養殖戶產量、產值、效益情況進行測產統計。

6.采用SPSS數據分析軟件對檢測數據進行方差分析。表中數據以M(平均值)、SE(標準差)表示。

二、結果與分析

1.不同的種草水域中,pH值網圍組高于池塘組,差異極顯著(p<0.01),溝渠組高于池塘組,差異顯著;化學需氧量網圍組顯著低于池塘組與溝渠組;氨氮網圍組顯著低于池塘組;總磷、總氮網圍組最低,亞硝酸鹽溝渠組最低,但各組差異均不顯著(p>0.05)。

2.溝渠組、網圍組高溫損失低于池塘組,網圍組高溫損失最低,各組間差異不顯著;池塘組與周邊同比減損最高,溝渠組次之,網圍組最低,池塘組與網圍組差異極顯著,溝渠組與網圍組差異顯著;總的畝均利潤溝渠組高于池塘組、網圍組,差異均極顯著;成本利潤率溝渠組最高,網圍組次之,池塘組最低,各組間差異均不顯著。

3.pH值各組間差異不顯著;化學需氧量水生植物單一型最低,與雙組型差異顯著,與復合型差異不顯著;氨氮單一型最低,雙組型最高,兩組差異顯著;總磷、總氮、亞硝酸鹽各組間差異不顯著。

4.高溫損失復合型高于雙組型和單一型,各組間差異不顯著;同比減損復合型最高,雙組型次之,單一型最低,復合型與單一型差異極顯著,雙組型與單一型差異顯著;總畝利雙組型高于復合型、復合型高于單一型,各組間差異不顯著;本利率雙組型較高,各組間差異不顯著。

5.各組間pH值、化學需氧量、氨氮、總磷、總氮、亞硝酸鹽差異均不顯著。其中30%以下組pH值最高,化學需氧量、總磷、總氮最低,70%以上組氨氮、亞硝酸鹽最低。

6.30%以下組高溫損失最低,30%~70%組高溫損失最高,兩組差異顯著;70%以上組同比減損最高,30%以下組最低,各組間差異不顯著;70%以上組總畝利最高,30%以下組總畝利最低,差異不顯著;30%~70%組本利率高于其他兩組,差異不顯著。

三、小結與討論

1.綜合結果表明,池塘循環水養殖凈化區與網圍養殖區經水生植物凈化后的pH、氨氮、總氮、總磷等水質指標均達到《太湖流域池塘養殖水排放標準》一級和《地表水水質標準》Ⅲ類水標準,COD達到《太湖地區城鎮污水處理廠主要水污染物排放限值》和《地表水水質標準》Ⅴ類水標準,因此,經水生植物處理的養殖水符合排放要求,也可滿足循環養殖用水要求。

2.湖泊網圍水域水質優于池塘循環水凈化區,池塘循環水溝渠型凈化區水質好于池塘型。網圍養殖高溫損失、同比減損均較少,總畝利和本利率較高,可認為高溫期間網圍養殖水位、水溫、光照條件的改變更適于水草生長,湖水自凈能力增強,受高溫干旱影響較小;池塘循環水養殖中,溝渠組高溫損失較低,總畝利和本利率高于池塘組,同樣是由于溝渠蓄水量大于池塘,加上水草的凈化作用,保障了足量優質水源,而池塘組同比減損最高,表明在凈化區水量偏少的情況下,種草仍然能夠起到較好的抗高溫作用。

3.水生植物單一型和復合型處理水質較好,單一型水生植物構成均為浮水植物,表明浮水植物處理水質效果較好,而雙組型、復合型水質處理效果并不優于單一型,這與沉水類植物在富營養化的水質中生存能力弱有關。復合型同比減損顯著高于雙組型,說明復合型水草應對高溫干旱天氣能力強,但總畝利和本利率略低于雙組型,說明種植和管護成本相對更高。凈化區水生植物栽種類型仍需要深入研究。

第3篇

水產養殖智能控制系統主要由臺達TP04P一體機、溶氧溫度傳感器(RS485接口)、工業級GPRSDTU模塊和智能監控管理系統等組成(圖1)。TP04P文本一體機的COM2為內建PLC的主站口,通過MODBUSRTU協議讀取溶氧溫度傳感器的溶氧值和溫度值;COM3口為內建PLC的從站口(需新測試版軟件的支持),用戶借助互聯網系統平臺和DTU模塊,通過COM3口遠程監測數據和控制設備。

2控制要求

用戶通過文本顯示器可以讀取當前水中的溶氧值和溫度值,并且將其顯示在首頁。用戶可以設定溶氧值的上下限,在旋鈕旋至自動模式時,水中溶氧值一旦低于設定的下限值,便自動啟動增氧機,水中溶氧值大于設定的上限值,便自動關閉增氧機。沖洗泵用于自動清洗傳感器,系統工作時,清洗15minh。用戶可以設定每天3個時間段強制增氧,當全設為0或錯設時不起作用;可以設定每天兩個時間點的自動投食,投食時長可以設定;可以設定萬年歷。用戶的網頁控制平臺可以通過GPRSDTU模塊實現遠程監控(讀取溶氧和溫度、設定1個啟動時間段、啟停投食、遠程控制增氧機的啟停等)。

3實現過程

3.1溶氧傳感器協議用戶的溶氧傳感器為MODBUSRTU協議,格式要求如下。①波特率:9600;②起始位:1;③數據位:8;④奇偶校驗位:無;⑤終止位:1。本協議參照Modbus消息幀,由地址域、功能域、數據域和錯誤檢測域4個域構成。①設備地址:1個字節,地址10為默認地址;②功能碼:長度為1個字節;③數據域;④CRC校驗。長度為2個字節,低字節在前,高字節在后。應答協議格式如表1所示。表1應答協議格式Tab.1Responseprotocolformat地址域功能碼字節數數據區(高字節在前低字節在后)CRC161004H08H8字節低字節高字節注:數據區=溫度電極電壓(2B)+溫度(2B)+溶解氧電極電壓(2B)+溶解氧(2B)舉例:發送:020400000008F1FF應答:020408102C290977179C279ED5

3.2臺達文本一體機PLC程序說明(1)PLC程序先進行COM2和COM3的通訊設置,COM2作為溶氧溫度傳感器的主站,通訊設置和溶氧溫度傳感器要求保持一致。COM3作為遠程平臺的從站,用于通過GPRSDTU與用戶平臺對接,通訊設置和遠程平臺一致(MODBUSRTU,9600,8,N,1)。(2)通過MODRD指令將傳感器檢測到的溫度和溶氧值讀至本地D1070~D1085寄存器中,因傳感器的溫度和溶氧是在一個功能碼里,而且是按8位存儲,這就要對所讀取數據進行左移8位作為高位,再與低8位合并成1個16位的數,這個數就是最終讀取的數據。這里將D1075通過ROL指令左移8位,再通過WOR指令與D1076邏輯或運算,得到的結果就是溫度值,同樣的方法對D1079和D1080進行處理即可得到實際溶氧值。(3)通過文本顯示輸入的溶氧上下限值與實際溶氧值進行比較,在自動模式下,當低于下限值,就自動啟動增氧機,當高于上限值就停止增氧機。(4)當增氧機啟動時,自動啟動定時器,累計達到50min后就立刻啟動清洗機來清洗傳感器,清洗機工作10min后自動復位停止,又進行累計50min再啟動,就這樣循環工作。

3.3臺達文本一體機文本軟件設置說明每個頁面均可進行功能鍵的設置,需要注意的是,如需快捷鍵實現對數據的依次輸入功能,可將該快捷鍵設定ON按鈕,讀寫選擇一體機PLC設置的M1195。因用戶的溶氧傳感器有兩款(一款國產,另一款為哈希傳感器),為方便用戶的使用,程序做兩個溶解氧通訊程序,文本顯示單獨做個按鈕M512來實現切換(切換后需斷電重啟)[1]。

3.4臺達文本一體機與GPRSDTU通信模塊及網頁平臺的對接GPRSDTU是將串口數據轉換為IP數據或將IP數據轉換為串口數據、通過GPRS通信網絡進行傳送的無線終端設備,使用的時候完全可以把它當作本地串口使用。本案例使用的是COMWAYDTU模塊(達創的DTU模塊使用更方便),將本地RS485口通過互聯網映射到平臺端(不需要公網IP和花生殼,硬件服務商的服務器自動進行兩端互聯),平臺端通過DTU的硬件ID自動識別用戶,通過DTU硬件商提供的虛擬串口軟件進行通信,使用的時候就好比本地的RS485口一樣,方便組態軟件及其他平臺軟件直接通訊[1]。

4結束語

第4篇

1.1混凝沉淀技術

混凝沉淀技術就是利用化學原理,將混凝劑加入水中,對水中的污染物進行有效去除,石灰鐵鹽與有機絮凝劑等常用的混凝劑因為其具有一定的毒性,所以不能直接在養殖用水中應用,而是用在水產養殖排水水質的處理上。

1.2臭氧氧化技術

臭氧如果具有強氧化性,就能在水中迅速自行分解,避免造成二次污染,具有除臭、殺菌、脫色以及去除有機物的作用,是一種比較有效的綠色氧化藥劑,這種技術主要運用于海水工廠養殖排水水質的處理中,具有較強的氧化作用,能夠有效分解、溶解以及降解水中的有機物。

1.3紫外輻射技術

紫外輻射技術利用紫外輻射對水體進行消毒,不僅能夠破壞水中殘留的臭氧,還能將大量的病菌殺死,具有無毒、高效以及低成本的特征,紫外輻射技術是一種比較成熟的養殖排水水質改善技術,主要應用于水產生殖排水的循環過程中。

1.4其他處理技術

在對水產養殖排水水質進行改善處理的過程中,離子交換技術以及電化學技術也是一種水質處理技術,但是離子交換技術主要在水族館或者科研項目中運用,應用范圍較小,而電化學技術還處于試驗階段,不完全適用于生態農業園的需求。

2生物處理技術

2.1人工浮床凈化技術

人工浮床凈化技術通過模擬自然界的各種變化規律,利用高分子材料和混凝土等載體,對水生植物進行種植,使其發揮清除水體污染物的作用,這種技術能夠凈化水質、美化水體景觀,為生物創造生存空間的功能,促進周圍生物的多樣性發展,加強其生態系統的完善,能夠很好地適用于生態農業園區的水產養殖排水中。

2.2人工濕地凈化技術

人工濕地凈化技術能夠按照水體的具置和實際情況,模擬濕地的結構與功能,綜合凈化與處理污水,構成水體、基層、微生物以及水生植物等人工濕地的主要元素,對銨、氮、硝酸鹽以及亞硝酸鹽等化學物質進行有效清除。

2.3水生動物凈化技術

水生動物凈化技術就是將水生動物放養于水產養殖所用水體中,不僅能夠起到凈化水質的作用,還能提高生態農業園水產養殖的經濟效益,是一種兼具實用性與經濟性的水質凈化技術。

2.4水生植物凈化技術

水生植物主要有沉水植物、浮葉植物以及漂浮植物,通過水生植物在生態農業園水產養殖區域的種植,能夠抑制水體中藻類的生長,并且具有一定的觀賞價值,同時能夠有效起到凈化水體的作用,實現一定的經濟效益。

3結語

第5篇

枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌很早便被用于飼料,農業部公告第1126號《飼料添加劑品種目錄》(2008)中微生物一欄依然只有這兩種,而2013年農業部公告第2045號《飼料添加劑品種目錄》(2013)中微生物一欄則增加到6種,增加了用于養殖動物的遲緩芽孢桿菌和短小芽孢桿菌,用于肉雞、生長育肥豬和水產養殖動物的凝結芽孢桿菌及用于肉雞、肉鴨、豬和蝦的側孢短芽孢桿菌。此外,在允許添加的酶制劑中,還有淀粉酶、β-葡聚糖酶、麥芽糖酶、β-甘露聚糖酶、蛋白酶、角蛋白酶和木聚糖酶可由芽孢桿菌生產。相信隨著研究的進一步深入,可用于飼料的芽孢桿菌種類會越來越多。芽孢桿菌在飼料加工、儲藏和飼喂中均有相應的特性保證其活力和性能不減,依次為飼料加工時可在不利的環境條件下形成孢子,可耐高溫、耐酸堿和耐擠壓,可經受制粒工藝的要求;儲存運輸中處于休眠期的孢子不消耗飼料的營養成分,保證飼料品質不降低;飼喂后芽孢進入動物腸道,可耐受消化液,在適宜的環境下迅速萌發,此過程可產生多種酶類及代謝產物。此外,芽孢桿菌除了添加于飼料外,還可作為一種水質調節劑,調節水體環境。

2飼用芽孢桿菌的益生功能研究進展

2.1維持腸道微生態平衡

目前,關于芽孢桿菌維持腸道微生態平衡的機制,普遍認可的主要有以下三個方面:一是生物奪氧。枯草芽孢桿菌屬好氧性細菌,而病原菌也多為好養性細菌,枯草芽孢桿菌在腸道中的生長繁殖必然消耗氧氣,對病原菌造成頡頏作用,同時造成腸道厭氧環境,有利于腸道原籍優勢菌繁殖,維持腸道正常生態平衡的作用;二是定植抗力。枯草芽孢桿菌及因其生長繁殖更加有利的動物腸道原籍優勢菌都會在腸道內占據一定的位點,導致病原菌可結合位點減少,從而因無法定植而被排斥;三是產生抑菌物質。芽孢桿菌生長繁殖中產生的乙酸、丙酸和丁酸等揮發性脂肪酸可降低動物腸道pH,從而有效抑制病原菌生長。此外因生長環境有利,一些原籍優勢菌可產生更多的細菌素和類細菌素等抑菌代謝物。

2.2促進營養物質的消化吸收

枯草芽孢桿菌進入動物腸道后,能迅速在腸道中萌發并增殖,產生多種消化酶,增強動物腸道對飼料的消化能力,促進營養物質的消化利用。芽孢桿菌不僅能產生蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等,還可誘導動物機體內源消化酶的分泌,產生的非淀粉多糖酶可以降解內源酶難以降解的植物性復雜糖類,如纖維素、果膠和葡聚糖等,有利于腸道更好地利用糖類,提高飼料轉化率。另外,枯草芽孢桿菌在生長代謝的過程中能產生其他多種營養物質,如維生素、氨基酸和促生長因子,參與動物自身新陳代謝,促進營養物質的消化吸收。

2.3增強機體免疫力

研究表明,芽孢桿菌可促進動物免疫器官發育,加快免疫系統的成熟,T淋巴細胞及B淋巴細胞的數量增多,使動物腸道相關淋巴組織處于免疫準備狀態。其機制可能是芽孢桿菌進入動物腸道后,可作用于腸道集合淋巴結的抗原結合位點;此外,芽孢桿菌可通過調節動物腸道的微生態平衡,特別是對雙歧桿菌的調節,間接增強動物的免疫力。

3飼用芽孢桿菌在水產養殖中的應用

腸道微生態的平衡是水產動物保持健康的重要保障,腸道微生態平衡一旦被打破,腸道環境會更利于病原菌的生長繁殖。當前,集約化養殖帶來的水體負荷過大和水質惡化等環境脅迫,極易導致水產動物腸道微生態失衡,使水產動物表現為病理狀態。因此,基于維護腸道微生態平衡的考慮,芽孢桿菌,尤其是枯草芽孢桿菌在水產養殖中得到了越來越廣泛的應用。目前,芽孢桿菌在水產養殖中的應用主要有以下兩種方式:直接投放于水體,起到改善水質和頡頏病原菌的作用;添加于飼料中投喂,起到改善生長性能、增強免疫功能、調節腸道菌群及保護腸道黏膜組織形態等作用。

3.1作為水質改良劑改善養殖水體的水質

芽孢桿菌能及時分解水體中的有害污染物質,將有機質分解為小分子有機酸、氨基酸及氨為單胞藻提供營養,凈化和穩定水質。尹文林等(2006)研究發現:枯草芽孢桿菌具有降解養殖水體氨氮、亞硝酸鹽氮和硫化物等作用。而張峰峰(2009)認為:雖然能夠降低水體pH及顯著降低水中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量,但不具有提高水體中溶氧含量和降低硫化物含量作用。趙迷淼等(2003)發現:施用枯草芽孢桿菌后,對蝦養殖池中的亞硝酸鹽和硫化氫等有害物質減少,施用芽孢桿菌的池塘化學含氧量(COD)值每次測量都低于未施用芽孢桿菌的池塘,且從施用前的9.5下降到8.2(施用10d),總堿度(ALK)降低,pH也穩定在適宜對蝦生長的水平。

3.2作為飼料添加劑提高水產動物的生長性能

芽孢桿菌添加于飼料中可改善動物的生長性能、增強免疫功能、調節腸道菌群及保護腸道黏膜組織形態等作用。這里重點闡述對動物生長性能的改善作用,主要在以下兩方面發揮作用。一是產生多種水解酶,可促進營養物質在動物體內的消化利用。芽孢桿菌在生長繁殖過程中可產生蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等消化酶,促進相應營養物質的消化利用。丁賢等(2004)在凡納濱對蝦、劉小剛等(2002)在異育銀鯽上都驗證了此作用。此外,芽孢桿菌還能分泌非淀粉多糖酶,如果膠酶和葡聚糖酶等,可降解飼料中復雜糖類。其次是產生營養物質直接供動物吸收利用。芽孢桿菌在生長繁殖過程中可產生維生素、氨基酸、有機酸和促生長因子等多種營養物質,參與機體新陳代謝,直接為機體提供營養物質。與此同時,還可促進動物對鈣、磷和鐵的利用,促進維生素D的吸收。

4小結

第6篇

一是具有比較性。這是“洼地效應”的核心特征,是開展經濟活動的基礎,更是抓好產業布局的關鍵,決策群體可以通過不同區域之間的區位、交通、資源、人才、技術、政策等因素的比較,根據需要做出適合產業發展的最佳組合。二是具有趨向性。趨向性即是一種形象性的概括,也是遵循市場規律的體現,市場在資源配置過程中,由于供需、成本、政策導向、資源開發等關系的作用下,引發資本流向發生改變,形成新興的產業集聚鄂爾多斯的羊絨、鏡泊湖旅游、深圳特區都是“洼地效應”的趨向性體現。三是具有周期性。洼地效應也是一個歷史發展過程,有其產生、發展、壯大、消亡的客觀規律,起始“洼地效應”不是那么,伴隨著“底層”設施建設、各項規章制度制定,“洼地效應”才會慢慢顯現出來,隨著資金、技術、勞動力的不間斷流入,市場開始飽和起來,對外依賴開始加大,競爭逐漸嚴重,“洼地效應”逐漸消失,也跟水流一樣,隨著位勢的降低速度不斷趨緩。

2.八五五農場創造“洼地效應”的比較優勢

前面我們從理論層面對“洼地效應”進行了簡要分析,在汲取科學發展要素的基礎上,下面我們以發展水產養殖業為重點,分析八五五農場產業發展的潛力和優勢。

2.1區位優勢

八五五農場,隸屬黑龍江農墾總局牡丹江管理局,位于密山市境西北部與寶清縣、七臺河市交界處。場部距密山市區60里路程。結合自然條件下的地理環境和發展乳肉禽蛋產業的區位要求,八五五農場具備了發展水產養殖的區位優勢。

2.2設施優勢

場區內有小的河流5條。北為撓力河水系的上、中游,南為穆陵河水系的上游金沙河、小裴德河,還有溝壑水線密布全場。總長度954千米,流域總面積760平方千米,流徑總量1.25億立方米,水域450公頃,占總面積的0.8%。場內已建數座水庫,一是金星水庫,庫容三百六十萬立方米,可以灌溉稻田200公頃;另一座是紅星水庫,庫容九百四十萬立方米,水面300~400公頃,可灌溉水田470公頃,有抽水站一座,可灌大田270公頃。另有育紅、金沙、青一、新西河水庫。形成了干、支、斗、農、毛配套齊全的立體化水利灌溉格局,輻射全場6個管理區,24個基層作業站,目前完善的灌渠設施系統是農場發展水產養殖的特有優勢。

2.3存續優勢

所說的存續是指農場區域內存在經營的水產養殖基地和廢棄續留的養殖基地,據畜牧水產部門統計,全場現有大小魚池52個,其中經營性魚池24個,續留性魚池28個,其中第二管理區的笨養活養魚基地占地5公頃,第四管理區的水汪汪水產泥鰍養殖基地占地4.7公頃,原東灌渠廢棄引渠待養殖水面達到7公頃,這些存續養殖場是農場重新規劃和打造水產養殖產業的基礎。

2.4市場機遇優勢

目前,農場水產養殖相比水產養殖先進地區仍處于相對落后階段,全場漁業年總產量36噸左右,僅占市場的16%以內。據調查牡丹江墾區漁業也處于起步階段,產量遠遠滿足不了人們消費需求。隨著經濟發展人們對水產品的需求量越來越大,特別是水庫地產魚類,近年來價格一直居高不下,興凱湖鯉魚價格從前幾年的每斤80元飆升到現在的每斤200元以上由此可見水產養殖的前景巨大。

3.發展水產養殖產業的定位思考

“洼地效應”是在基礎產業比較優勢凸顯的基礎上形成的資本集聚過程,對于八五五農場來說江水養殖產業尚處于初級開發階段,但是從比較優勢上分析,農場已經具備了創造洼地效應的環境和條件。

3.1發展網箱養魚

即利用境內河流沿線水流平緩、水質清新,使用網箱進行魚類飼養。

3.1.1可行性分析

一方面,主要由于水本身的流動再加上魚類的活動具有類似流水池的特性,箱內外的水質不斷更新推動溶氧和餌料持續得到補充,代謝物和殘餌時排出箱外,箱內水質始終能保持良好狀態。另一方面,網箱把魚類限制在有限的空間內,避免兇猛魚類、風浪的危害和侵襲,能量消耗低,營養積累增加,利于生長和育肥。容易控制兇猛魚類的危害和競爭者的威脅,存活率高;容易捕撈,商品率高,經濟效益好等特點。

3.1.2效益評估分析

我們在對密山市網箱養魚科技區多年的實踐看到:100平方米的網箱養魚產量,和25畝池塘養殖量相同,1個工人可以管理3-4個網箱正常生產運行,而一個20畝的池塘至少需要3個工人。從下面分析的數據來看,在在正常生產和正常銷售的情況下,每個網箱效益計算如下:在2014年1個網箱數產量達到2400千克,成本為3.1萬元,總產值為16.8萬元,純利潤就達13.7萬元。排除非可抗自然因素外,每個網箱的年利潤相當于種植16-18公頃水田,以八五五農場200個可扶持的低收入的家庭計算,人均1個網箱,可以實現3000萬/年的增產,數量變化可導致幾何數增長,網箱養江魚的前景非常可觀。

3.2發展泥鰍養殖

即充分利用閑置的沙坑、洼塘和稻田定向養殖。

3.2.1可行性分析

一是從需求角度上看,因為泥鰍的營養和藥用價值非常高,拒不完全統計,國內市場需求量每年達到30-40萬噸,主要消費國的韓國和日本每年需求量也在30萬噸以上,但目前國內市場供應量不到40%,出口量更是有限,由于污染、過度捕撈等因素加速了國內外對泥鰍的需要,據水產專家介紹,淡水養殖的泥鰍有著非常廣闊的發展前景;二是從資源條件上看。八五五農場得天獨厚的水田優勢,適合發展稻田養殖和洼塘養殖,轄區內河流水里擁有大量的天然泥鰍,就可以得到免費的泥鰍魚苗,而且天然的魚苗適應能力強,成活率高,大大降低了養殖成本。

3.2.2效益評估分析

一是稻田養殖,據水利部門調查顯示:稻田養泥鰍病害少、省工省飼料,有利于管理,綜合效益高,水稻、泥鰍互生一舉兩得,每畝稻田可產泥鰍50斤左右,去掉成本,產值在200元/畝,以全場水田計算,每年直接增收近五千萬元。二是洼塘養殖,即采取專業化、規模化養殖的模式,據畜牧水產部門提供信息,全場現有適合定點養殖的洼塘50余處。

4.形成水產養殖

“洼地效應”的潛在要求前面我們綜合分析了八五五農場創造洼地效應的比較優勢和布局產業的客觀條件,但是能否形成這種效應使之達到最大化的效果,筆者認為還需在產業延伸配套上做好準備工作。

4.1完善的倉儲設施

這是水產養殖的必備條件之一,水產品具有流動性、保鮮性、季節性強的特點,所以具備“夏保鮮、冬冷藏”的庫藏設施能夠使經營者在開放的市場條件覓尋良機獲得最大收益。

4.2完善的運輸設備

隨著生活水平的提高,人們對食品安全的高度重視,餐飲市場對水產品的質量要求提高,保鮮運輸已經成為水產配送的重要環節,所以對于水產養殖產業具備與倉儲配套的配送運輸設備成為必要條件。

4.3完善的加工體系

第7篇

1.1過濾技術膜過濾技術與機械技術是過濾技術的2種主要方式。膜過濾技術通過利用具有不同孔徑的膜對顆粒物進行濾除,對不同粒徑的顆粒物進行有效截留,超濾技術與橫流式微濾是有效去除小粒徑顆粒物的方法,主要應用于具有較高養殖經濟價值的水產品的廢水處理;機械過濾利用過濾設備根據吸附作用對養殖排水中的餌料進行去除,還能有效清除養殖生物的排泄物以及重金屬等污染物。

1.2泡沫分離技術泡沫分離技術主要將大量空氣注入污水,在微小氣泡上附著水的表面活性物,在氣泡上升至水面時形成泡沫,在這種情況下采用分離水面泡沫的方法就能有效去除污水中的懸浮態污染物,這種技術能夠將溶解氧提供給養殖水,避免有毒物質的積累,但是因為生態農業園中的淡水養殖缺乏足夠的電解質,不能形成較多的泡沫,所以會導致其應用效果不佳。

1.3其他處理技術其他水產養殖排水水質改善技術還包括機械增氧技術與排換水技術兩種,此外,反滲透技術、高分子重金屬吸附技術以及活性炭吸附技術也是有效改善水產養殖排水水質的技術與手段。

2化學處理技術

2.1混凝沉淀技術混凝沉淀技術就是利用化學原理,將混凝劑加入水中,對水中的污染物進行有效去除,石灰鐵鹽與有機絮凝劑等常用的混凝劑因為其具有一定的毒性,所以不能直接在養殖用水中應用,而是用在水產養殖排水水質的處理上。

2.2臭氧氧化技術臭氧如果具有強氧化性,就能在水中迅速自行分解,避免造成二次污染,具有除臭、殺菌、脫色以及去除有機物的作用,是一種比較有效的綠色氧化藥劑,這種技術主要運用于海水工廠養殖排水水質的處理中,具有較強的氧化作用,能夠有效分解、溶解以及降解水中的有機物。

2.3紫外輻射技術紫外輻射技術利用紫外輻射對水體進行消毒,不僅能夠破壞水中殘留的臭氧,還能將大量的病菌殺死,具有無毒、高效以及低成本的特征,紫外輻射技術是一種比較成熟的養殖排水水質改善技術,主要應用于水產生殖排水的循環過程中。

3生物處理技術

3.1人工浮床凈化技術人工浮床凈化技術通過模擬自然界的各種變化規律,利用高分子材料和混凝土等載體,對水生植物進行種植,使其發揮清除水體污染物的作用,這種技術能夠凈化水質、美化水體景觀,為生物創造生存空間的功能,促進周圍生物的多樣性發展,加強其生態系統的完善,能夠很好地適用于生態農業園區的水產養殖排水中。

3.2人工濕地凈化技術人工濕地凈化技術能夠按照水體的具置和實際情況,模擬濕地的結構與功能,綜合凈化與處理污水,構成水體、基層、微生物以及水生植物等人工濕地的主要元素,對銨、氮、硝酸鹽以及亞硝酸鹽等化學物質進行有效清除。

3.3水生動物凈化技術水生動物凈化技術就是將水生動物放養于水產養殖所用水體中,不僅能夠起到凈化水質的作用,還能提高生態農業園水產養殖的經濟效益,是一種兼具實用性與經濟性的水質凈化技術。

第8篇

線粒體DNA非編碼區由兩個tRNA基因分離,D-loop區域就處在這個非編碼區中[2]。在線粒體DNA中,D-loop區是重鏈和輕鏈的復制起點,也稱之為“控制區ControlRegion”,其進化壓力較小,是線粒體DNA基因組序列和長度變異最大的區域,Horai等[3]發現該區域的基因變化速度比細胞核DNA和其他細胞器的基因快5倍,同時也是進化最快的部分。因此,選擇D-loop區作為鑒定種群遺傳狀況的分子標記直接有效。利用D-loop的序列在群體遺傳學上進行分析的工作在20世紀70年代就已經展開了,那時候僅僅用于分析區域內種間的親緣關系。現今,D-loop區已經廣泛被用作非常高效的工具來推斷不同區域內種間或種內的親緣關系和遺傳狀況。D-loop區中仍然細分為3個部分,中央保守區、終止序列區和保守序列區。其中終止序列區包含了線粒體DNA終止復制的相關序列,是變異最大的部分[4],最具研究和分析價值。在進行數據結果分析時,由D-loop序列分析得到的單倍型多樣性指數和核苷酸多樣性是兩個評價群體遺傳資源或者群遺傳多樣性的重要指標。

1.1野生群體遺傳多樣性分析

1.1.1D-loop部分序列分析D-loop序列分析中,由于并不是整個D-loop序列都發生堿基的插入或者替換,可以采取對保守序列區或者終止序列區的部分區域進行擴增。由于這兩個部分的進化比中央保守區迅速得多,只對這一區段的序列進行分析也能代表物種的遺傳多樣性和進化過程。張仁意等[5]對青海4個不同湖水采集的155尾裸鯉(Gymnocyprisprzewalskii)個體的線粒體DNA的D-loop區中部分序列進行擴增,得到754bp的序列長度,分析發現155個樣本中有34個單倍型,但4個群體中可魯克湖群體的單倍型多樣性和核苷酸多樣性遠低于其他種群;進一步的遺傳分化系數的分析表明,該地區已經產生一定的遺傳分化,但由于地理隔離的原因,系統發育樹結果還沒有發展出明顯的單枝,加之該區域群體的遺傳多樣性偏低,需要進行重點保護。

鄭真真等[6]對全球大青鯊(Prionaceglauca)進行了D-loop區中694bp擴增分析,采集了來自中東太平洋、中西太平洋、中東大西洋、西南大西洋和印度洋5個海域的165尾個體,分析發現145個單倍型,變異程度非常大。進一步分析后發現5個區域的大青鯊種群的單倍型和核苷酸都處于較高水平,種質資源較好;但是遺傳分化指數顯示5個區域存在強烈的基因交流,種群遺傳分化水平較低。鄒芝英等[7]采集了8尾長鰭鯉(Cyprinuscarpiovar.longfin),擴增得到600bp的部分序列,找到了與終止區域相關的6個特征序列;對這些特定的區域分析得到6個單倍型,13個變異位點,顯示了較好的種質資源狀況,核苷酸多樣性數值與其他魚類接近,遺傳狀況中等,由于該物種稀有且僅存在偏遠地區,保護珍惜水產動物資源已經迫在眉睫。向燕等[8]為了了解3種鱘魚:達氏鱘(Acipenserdabryanus)、中華鱘(A.sinensi)和史氏鱘(A.schrencki)親魚的遺傳狀況和遺傳背景,對線粒體D-loop區部分序列進行分析,擴增得到400bp的序列,49尾親魚個體一共得到僅18個單倍型,并且對于單倍型系統發育樹分析后,發現集中在6個單倍型中,說明這些群體很有可能來自同一母親;不過各單倍型遺傳距離較遠,說明父本來自不同的個體;其結果提示,在生產中仍要采用不同單倍型進行人工繁育,以避免近親而導致種質退化。

Kumazawa等[9]研究發現,D-loop的5'端和3'端有串聯重復序列,這段的變異速率較快。Abinash等[10]在北美不同區域采集淡水扁頭鯰(Pylodictisolivaris),對35bp的串聯重復區進行分析檢測,從美國35個水系采集了330尾樣本,分析結果發現,在東南墨西哥灣的70%樣本出現串聯重復的變異,而采自密西西比河95%的樣本和墨西哥灣西南沿岸的扁頭鯰沒有出現這個區域的變異;系統發育的計算結果表明,在70萬年和205萬年左右出現群體分流;從地理位置上看,密西西比河的支流進入墨西哥灣西南沿岸流域,而東南墨西哥灣為另一條流域;該結果表明種群的遺傳結構受到地域特殊性的影響。D-loop區部分序列的結果分析能滿足一定程度的遺傳多樣性和遺傳狀況分析,可以得到可靠的結果數據幫助人們進行資源保護和簡單的育種工作。隨著科技進步和測序水平的改善,進行全序列的測序漸漸進入研究者的視野,全長序列將獲得更加完整和正確的結果。

1.1.2D-loop全序列分析D-loop的多態性一種是來源于堿基的突變、插入和替換形成的不同單倍型,不僅種間有差異,種內個體間也存在差異,只是重復的差異小于種間的差異。而且在個體中D-loop一旦發生差異,線粒體DNA會穩定地將這種差異遺傳下去,這種差異在個體間表現為線粒體DNA分子的長度變異,因此對D-loop全長進行分析研究更能體現整體的變異程度。肖明松等[11]在淮河淮濱段、鳳臺段、蚌埠段、洪澤湖段采集84尾野生烏鱧(Ophicephalusargus)進行種群資源的研究,分析發現33個單倍型,檢測了單倍型多樣性(h)、核苷酸多樣性(Pi)、遺傳分化指數(Fst)、遺傳距離以及中性檢驗、錯配分析和NJ樹,發現其h和Pi較高,表明種群平均多態性相對較好;但在遺傳距離的分析中發現所有群體的差異都較小,這可能是由于在淮河流域中不同支流的種流程度較高造成的,所以變異發生在種內,而種群之間的分化較少。董志國等[12]對大連、東營、連云港、舟山、湛江和漳州6個地區的野生三疣梭子蟹(Portunustritubercatus)進行D-loop全基因組區的遺傳多樣性及群體遺傳結構的分析,選擇單倍型多樣性和核苷酸多樣性作為重要指標,并加入了群體遺傳分化指數的分析,進行Tajima’sD中性檢驗和單倍型間的分子變異分析,發現不同地區梭子蟹的遺傳多樣性很高,產生一定的遺傳分化;不過在系統發育關系分析中,地理距離對遺傳距離沒有顯著的關系,原因仍需要進一步研究。趙良杰等[13]在千島湖汾口、富文、臨岐3個大眼華鳊(Sinibramamacrops)主要繁殖區域采集了115尾個體,對樣品進行了形態學和D-loop序列測定后,分析形態主成分和各個基因遺傳學分析指標,發現千島湖各地的大眼華鳊之間有豐富的基因交流,并沒有形成容易滅絕的小種群,表明各個地理群體仍然有豐富的遺傳多樣性,面對一定的災害時有一定的彈性,不過這樣的良好狀況仍然需要政府和漁民對該區域的種質資源進行保護。高志遠等[14]對海南松濤水庫南豐鎮、番加鄉、白沙群體的長臀鮠(Cranoglanisbouderius)的D-loop序列全場進行分析,44尾個體中發現11個單倍型,但在分析中發現單倍型較高,而核苷酸多樣性較低,認為是由于海南島偏僻的地理位置難與大陸長臀鮠進行基因交流,推斷在歷史中可能出現過嚴重的瓶頸效應;中性檢測也表明沒有任何整體或局部的種群擴張,數據皆表明該地域長臀鮠正處在較危險的境地,需要進行種群的保護措施。

1.2養殖群體遺傳多樣性分析目前,國內對水產動物養殖過程中出現的生長不良與病害頻繁大多歸結于飼料與環境的問題。誠然,營養和免疫是養殖的關鍵,但是由于人工育種和繁育雜交造成的種質資源下降也是重要因素之一。養殖戶往往在育種過程中,沒有考慮到育種群體的遺傳狀況,導致近親雜交,子代產生各種問題。徐鋼春等[15]對灌江納苗養殖刀鱭(Coilianasus)的子三代品種與在淡水生活環境下湖鱭(C.nasustaihuensis)兩個群體的遺傳多樣性進行了比較和分析,進行單倍型和核苷酸分析后,發現養殖刀鱭的遺傳多樣性要優于湖鱭,這可能是由于刀鱭僅是子三代,還未經歷大量的人工繁殖和育種,保留了較好的遺傳狀況;而湖鱭由于其陸封型的特點,導致其種質資源漸漸下降,需要進行放流等活動保證種質資源。姚茜等[16]對來自浙江湖州某公司的養殖群體、緬甸引進的群體和兩者雜交的“南太湖1號”群體的羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)的D-loop區進行分析,共16尾群體分析得到14個單倍型,結果表明緬甸引進的群體核苷酸多樣性最高,浙江湖州人工養殖群體的多樣性最低,說明人工育種對遺傳多樣性有較大的影響。通過遺傳距離和遺傳分化指數分析發現,雜交群體更加偏向本地種群。在今后的育種工作中,可在雜交代中選取優秀性狀的沼蝦,與緬甸種群雜交,以獲得更優秀的品種,為今后的人工繁育打下基礎。李勝杰等[17]將珠江水產研究所養殖品種大口黑鱸(Micropterussalmoides)與北方和佛羅里達兩個野生群體進行D-loop區的遺傳分析,在23尾采集的樣品中,5尾個體含有兩種單倍型,北方11尾個體發現9種單倍型,而佛羅里達僅有1種單倍型。在遺傳距離分析上發現,珠江水產研究所的養殖群體與北方群體更加接近。對于單倍型多樣性和核苷酸多樣性分析,結果表明養殖群體與國外種群相比,其遺傳多樣性處于較低水平,需要開展種質的保護工作,應引入國外品種進行雜交,改善國內養殖群體的遺傳結構,提高遺傳多樣性,豐富大口黑鱸的種質資源。

1.3親緣與起源分析D-loop區串聯重復的現象雖然豐富,但是不同動物的重復位置不一致,重復的序列和重復的單元也不一致,所以相近物種之間對比分析有助于明確不同物種的關系。郝君等[18]對烏克蘭鱗鯉(Cyprinuscarpio)、鯽(Carassisauratus)、鰱(Hypophthalmichthysmolitrix)、鳙(Aristichthysnobilis)、草魚(Ctenopharyngodonidellus)和烏蘇里擬鲿(Pseudobagrusussuriensis)6種不同魚的線粒體D-loop區進行測序,分析了種內、種間遺傳結構差異,發現作為分子標記對系統分化效果的差異,6種不同魚的堿基含量、堿基差異、遺傳距離和系統發育都有顯著的差異,構建的D-loop序列的NJ系統樹展示了6種魚的分類地位,肯定了D-loop區比鄰近區段的tRNA和12sRNA在魚類識別、分類、種類鑒定和遺傳多樣性分析上更加可靠。侯新遠等[19]對5種蝦虎魚類進行了系統進化關系的研究,分析了河川沙塘鱧(Odontobutispotamophila)、鴨綠沙塘鱧(O.yaluensis)、中華沙塘鱧(O.sinensis)、葛氏鱸塘鱧(Perccottusglenii)及尖頭塘鱧(Eleotrisoxycephala)這6種蝦虎魚類同源長度約為830bp的D-loop序列,通過系統發育樹和遺傳距離分析,得到6種魚類的親緣關系即河川沙塘鱧、鴨綠沙塘鱧、中華沙塘鱧、平頭沙塘鱧聚為一支,尖頭塘鱧、葛氏鱸塘鱧和褐塘鱧等聚為另一支,為魚類資源的分類和利用提供了基礎。馬波等[20]在額爾齊斯河采集了兩種類型的銀鯽(C.auratusgibelio),對幾種鯽魚的可量性狀和D-loop區進行分析,得到了優勢種群的生長性狀,確定了它們的遺傳學特征和分類學地位,同時通過D-loop區的單倍型共享率研究了兩種鯽的起源和遺傳特征,這些結果對我國將來進行銀鯽育種有很大幫助。Klaus等[21]利用D-loop序列對歐洲鯉魚(C.carpio)137的起源進行研究。在此之前對于歐洲鯉魚也有過很多關于起源的研究:Zhou等[22]發現一些歐洲養殖的鯉魚起源可能在德國和歐洲,而俄羅斯主要養殖的鯉魚起源在亞洲。Zhou等[23]在德國鏡鯉和伏爾加河的野生鯽魚利用D-loop區全序列獲得獨特的3種單倍型;而Mabuchi等[24]在日本鯉魚中發現有兩個D-loop區單倍型與Zhou等報道的歐洲發現的單倍型非常相似。Klaus等[21]的研究結果指出歐洲和中亞所有的鯉魚品種有一個共同的祖先,而且有可能是在后冰河時期傳播到中亞或者歐洲。對于這種現象,可能是由于在育種過程中,沒有進行規范的養殖記錄,導致各種群出現雜交現象。而且,養殖戶挑選具有優勢性狀的品種進行,容易導致其他稀有單倍型的消失,從而使得種質資源慢慢下降。

1.4個體內異質性分析同一個體內存在多種重復序列數目不同從而表現為異質。高祥剛等[25]采用克隆技術,在我國海域隨機采集了3頭斑海豹(Phocalargha),每尾個體任選14個克隆菌,對它們的線粒體DNAD-loop區的終止序列區進行擴增測序,發現其個體內存在多種不同的串聯重復單位,即存在異質現象,說明我國的斑海豹種質資源保護較好,進化狀態比較積極。張四明等[26]在野生的中華鱘種群種間和個體體內檢測線粒體DNA的長度變異情況,發現中華鱘有較多個體的異質性,表現出良好的遺傳多樣性。由此可見,個體的異質存在是導致線粒體DNA中控制區D-loop長度變化的主要原因,而個體的線粒體DNA長度異質性是直接推動動物物種遺傳多樣性的重要途徑。綜上所述,可以發現線粒體D-loop區的序列分析已經在水產行業取得大量進展,D-loop區基因的插入、突變和替換都是影響多樣性的關鍵,而個體內的異質和串聯重復的高頻率變化不僅存在于水產動物個體中,也存在于種群內,甚至在不同物種之間都對野生水產動物的起源、親緣關系、遺傳多樣性、遺傳結構和動物進化程度起著重要的作用。在養殖群體中,D-loop區的分析正在漸漸起到重要的作用,若結合微衛星、RFLP等其他分子標記技術,將來對人工育種和對親魚、親蝦的選育工作有重大意義。

2細胞色素b序列(cytb)

線粒體DNA中編碼蛋白質的基因有還原型輔酶I的亞基、ATP合成酶的亞基、細胞色素c氧化酶的3個亞基和細胞色素b[27]。Zardoya等[28]研究認為,cytb的進化速度適中,適合進行種內和種間的遺傳分析。現今利用cytb序列多數用于種內和種間的遺傳分化分析、遺傳圖譜建立和遺傳多樣性調查,并輔以其他標記技術進行組合分析。王曉梅等[29]獲取中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)cytb序列的PCR產物后,利用DGGE技術分析了溫州、儀征、江都、南京、盤錦和合浦地區的中華絨螯蟹的遺傳多樣性,并與合浦絨螯蟹(E.japonicahepuensis)對比,發現中華絨螯蟹與合浦絨螯蟹遺傳距離較大,在親緣關系上具有顯著的差異,但是仍有部分遺傳標記相同,說明存在一定的基因交流。

黃小彧等[30]利用cytb序列檢測了長江支流貴定與干流合江和宜都的中華倒刺鲃(Spinibarbussinensis)群體的遺傳多樣性,分析群體的遺傳距離,結合地理因素分析了該物種的種質資源現狀,發現合江的遺傳多樣性最好,而支流群體與干流群體的遺傳分化較大,地理隔離使同一物種的基因交流程度降低。夏月恒等[31]利用cytb序列對中國近海3個地區的鮸魚(Miichthysmiiuy)的遺傳多樣性進行分析,通過對地理環境和歷史因素的解釋,認為中國鮸魚基因型的單倍型多樣性高和核苷酸多樣性低可能是因為種群在某個時期突然擴張,使單倍型突變大量產生,但這段時間對于提高核苷酸多樣性時間不足,所以產生了如此差別;且Fst結果極低,說明該地區遺傳分化程度很低,加上不同地理的單倍型網絡圖交錯呈現,有可能是因為種群由于擴張之后還未達到平衡,需要對該地區進行保護。鐘立強等[32]調查了長江中下游5個湖泊的黃顙魚,利用cytb序列分析了不同地區遺傳多樣性和遺傳分化的程度,60尾個體檢測出37個單倍型,Fst分析顯示這5個種群的變異大部分都來自群體內,說明各個種群間有一定的基因交流,系統樹顯示它們沒有分化成譜系。司從利等[33]從長江貴定和樂山兩個群體的泉水魚cytb序列分析其遺傳狀況、結構和多樣性程度,發現這兩個群體由于三峽大壩的地理因素,已明顯受到嚴重的影響,出現高度的遺傳分化,建議對該物種進行分區保護,提高遺傳多樣性,豐富種質資源。

司從利等[34]在廣東、廣西等地基于cytb序列分析了華南居氏銀魚(Salanxcuvieri)的遺傳現狀,從鄰接樹上可發現有一定的分支,認為地理因素正在逐漸影響遺傳結構,推測瓊州海峽的地理位置可能影響廣東、廣西種群間的遺傳交流;中性檢測結果表明在更新世晚期發生擴增,地球當時的氣候影響了該種群的遺傳多樣性;根據現狀,建議分地區對該種群進行人為保護,避免出現種質退化。李偉文等[35]兩年中在7個遠洋捕撈點采集了黃鰭金槍魚(Thunnusalbacares),擴增了cytb部分序列得到663bp,108尾個體僅有24個單倍型,且單倍型多樣性和核苷酸多樣性都處于較低水平,群體的遺傳多樣性較差;Fst分析得到變異大多發生在群體內部,表明其遺傳分化程度較低,并且基因交流非常強烈,種質資源正在衰退,這與人類破壞環境和大面積捕殺有密切關系。謝楠等[36]利用cytb對魴屬(Megalobrama)4種魚類及長春鳊(Parabramispekinensis)進行了系統分類。但在結果分析過程中僅靠cytb的信息難以準確將不同品種進行區分,仍需要配合其他標記進一步研究。

3其他標記與組合分析

16SrRNA序列、12SrRNA序列和COI序列在線粒體基因組中變異速度較慢,保守性較高,因此很難由其單獨作為驗證工具來進行遺傳分析,往往需要結合其他的基因片段,才能同時作為鑒定種內親緣關系和物種遺傳多樣性程度的工具。劉萍等[37]選取了山東青島中華虎頭蟹(Orithyiasinica)野生群體的16SrRNA和COI基因片段研究其遺傳多樣性,但是發現16SrRNA變異程度較小,效果不佳;在遺傳距離和系統進化研究中,兩種技術檢測了不同蟹之間的親緣關系以及它們的進化分化時間,利用NJ系統進化樹發現中華虎頭蟹與梭子蟹類的親緣關系最近,并采用“分子鐘”對4個蟹類的分化時間進行計算。吳玲等[38]對沿海6個群體的白氏文昌魚(Branchiostomabelcheri)和日本文昌魚(B.japonicum)分別進行COI和16SrRNA序列的研究,發現兩種魚種內遺傳多樣性較高,但還沒有明顯的遺傳分化;其中茂名群體和威海群體具有最高的核苷酸多樣性,很有可能為這兩類魚的祖先。

翁朝紅等[39]對近江蟶(Sinonovacularivularis)、縊蟶(S.constricta)、小刀蟶(Cultellusattenuatus)、尖刀蟶(C.scalprum)和大竹蟶(Solengrandis)的COI和16SrRNA部分序列進行測序和分析,在進行遺傳距離和系統演化分析后,結果表明近江蟶已進化至獨立為一個種,并且通過聚類分析推斷近江蟶應歸屬于竹蟶超科,解決了這幾種蟶分類歸屬。郁建鋒等[40]結合12SrRNA和16SrRNA的序列為太湖流域河川沙塘鱧的分類提供了重要的幫助,發現了大量的變異位點和簡約位點,而且在兩種標記的驗證下,比較得出太湖流域河川沙塘鱧與福建流域河川沙塘鱧已經存在一定的遺傳差異。同時,系統發育樹分析表明,太湖流域河川沙塘鱧與其他鱧已存在遺傳分化差異。王慶容等[41]對長江中上游舞陽河、烏江、雅礱江、岷江和金沙江5個野生鲇(Silurusasotus)群體的親緣關系和遺傳差異進行了分析,對比了核苷酸和單倍型多樣性,發現舞陽群體與其他群體的親緣關系較遠。楊慧榮等[42]同時利用D-loop和cytb的序列對長江水系的赤眼鱒(Squoliobarbuscurriculus)進行了遺傳多樣性的分析,通過遺傳變異率、單倍型多樣性等指標發現長江赤眼鱒遺傳多樣性較高,種質狀況較好;同時,根據Fst和分子變異等級差異分析發現,不同水系的群體存在明顯的遺傳分化;系統發育樹證明了珠江水系赤眼鱒與長江水系赤眼鱒正在逐漸分化為兩類群體,并提出cytb序列在變異顯著的群體間更能發揮作用。

孫希福等[43]利用cytb序列和D-loop序列分析了江豚(Neophocaenaphocaenoides)在鼠豚類及一角鯨類的分類地位,系統發育樹表明,江豚的遺傳距離與一角鯨科較為接近,并確定棘鰭鼠海豚、太平洋鼠海豚及黑眶鼠海豚3種群有較近的親緣關系,否定了之前僅憑借形態學的分類方式。畢瀟瀟等[44]在某一水產品公司采集了來自美國與荷蘭的狹鱈(Theragrachalcogramma)、太平洋鱈(Gadusmacrocephalus)、藍鱈(Micromesistiuspoutassou)和遠東寬突鱈(Eleginusgracilis)4種不同屬的鱈魚,利用16SrRNA、cytb和COI序列比較了它們的序列結構,根據核苷酸分歧速率以及NJ系統發育樹,將太平洋鱈、狹鱈和寬突鱈歸為一支,也顯示了它們較接近的遺傳距離,給分類學提供了非常重要的理論基礎。

4展望

線粒體分子標記技術主要用于物種的遺傳多樣性分析、親緣、親權分析和物種進化程度分析。該基因組功能重要且能穩定遺傳,是物種個體基因組中變化速度較快且保留較好的部分。對D-loop區的序列進行測序、比對、計算和分析后能得到物種的種屬分類、遺傳結構、歷史發育情況和遺傳多樣性狀態。而且,D-loop區穩定的母系遺傳,使得分析起源有較好可靠性,聚類分析結果準確。同時,細胞色素b和16SrRNA等序列雖然進化速度較慢,但其穩定性的特征可以得到較好保留,獲得的插入、替換和缺失等突變可以持續遺傳,以作為數據分析的可靠依據。在進行不同情況的分析時,可以結合一到兩種分子標記技術,作為重要的輔助參考標記。

綜上,在水產行業的遺傳分析中,野生群體的遺傳多樣性是將來進行育種和引進的關鍵,通過線粒體分子標記技術對野生經濟水產動物的遺傳結構和遺傳多樣性分析是高效、準確和可靠的。其中單倍型多樣性和核苷酸多樣性表現了分子結構的變異程度,體現了野生群體種質資源的現狀;遺傳分化特征能表現群體的基因交流狀況,表明了群體間自由的自由度;分子變異等級分析可以讓我們了解不同地域群體突變的來源,表現了群體遺傳結構的差異;中性檢測等分析從分子層面揭示了魚類的系統發育狀況。

第9篇

乳酸菌是水產養殖中廣泛使用的菌。乳酸菌可以分解糖類產生乳酸,為革蘭氏陽性,厭氧或兼性厭氧生長,耐酸,在pH3.0~4.5時仍可生長,適應于胃腸的酸性環境。常用的是嗜乳酸桿菌,菌株為桿狀,兩端圓形。

乳酸菌是魚腸道中的正常菌群,能在魚腸道中定植,定植后能合成動物所需要的多種維生素,如維生素B1、葉酸等;在動物體內通過拮抗降低pH,阻止致病菌的侵入和定植,維持腸道內的生態平衡;能阻止和抑制有害物質,抵抗革蘭氏陰性致病菌,增強抗感染能力;降解動物體內氨、糞臭素等有害物質;活菌體和代謝產物中的活性物質能增強機體腸黏膜的免疫調節活性,增強體液免疫和細胞免疫,增強機體調節活性,促進生長。

二、乳酸菌產品在水產上的應用

1.潑灑降pH值

乳酸菌制劑潑灑進入水體后,在適合的條件下繁殖,分泌乳酸等代謝產物降水體的pH值,具有持效的特點。乳酸菌因厭氧或兼性厭氧,在池底會長得好。使用:將乳酸菌產品用50倍以上池水稀釋后全池均勻潑灑,每畝水面(水深1米)使用乳酸菌制劑100克以上(1克活菌量≥50億個)。使用注意事項:①晴天上午使用,使用時及時有效增氧2小時以上,當晚注意有效增氧;②使用時配合紅糖溶解潑灑效果更佳;③避免與氧化劑、抗生素或消毒劑同時使用。

2.乳酸菌內服

乳酸菌是目前廣泛應用的一類益生菌,是溫血動物胃腸道中的優勢菌群。乳酸菌在飼料添加劑中具有重要地位,在美國FDA公布的42種微生物中有近30%是乳酸菌類。乳酸菌雖不是魚類腸道內的優勢菌群,但普遍認為乳酸菌是魚類腸道的正常菌群成員。在魚類養殖中,通過添加含乳酸菌的飼料可抵御致病菌侵襲、提高苗種成活率,有促進生長的作用。乳酸菌產生的代謝產物能降低日糧pH值,使胃內pH值下降,酶的活性提高;胃腸道微生物區系改善。有些有機酸是能量轉換過程中重要中間產物,可直接參與體內代謝,提高營養物質消化率。乳酸菌作為魚類益生菌,在腸道內具有較好的定植能力,而且在水產動物中,這種定植無明顯的宿主特異性。乳酸菌內服的缺陷性:該菌在生長過程中不形成芽孢,抗逆性差,易失活而難以保藏,在飼料中添加使用受到一定限制。

3.乳酸菌發酵飼料

近年來,使用乳酸菌產品發酵水產飼料后再投喂,誘食、增食效果好,提高成活率明顯。尤其在南美白對蝦的養殖上,使用發酵飼料可以增加投喂量,縮短攝食時間、降低發病率,接受度頗高。

常見的蝦飼料發酵有兩種方式:①充分發酵,乳酸菌、飼料、水充分混合,密閉容器,放置于常溫下發酵培養5天以上,聞之有酸香味,pH在4.0左右表示培養成功;②快速發酵,發酵20小時左右。先把200克菌粉(1克活菌量≥50億)放入14千克水中溶解,加入20千克干餌料混勻,密閉容器(如果是濕餌料,加水到物料用手捏住有水快速滴下即可)。根據氣溫變化大概24~48小時發酵好,有一股酸香味,可投喂。發酵飼料的注意事項:①餌料中不要添加抗生素或消毒劑;②餌料發酵成熟再使用;③發酵時每40千克飼料添加500克紅糖效果更佳。

三、乳酸寶菌

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