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1急性白血病
白血病是起源于造血干細(xì)胞的惡性克隆疾病，受累細(xì)胞（白血病細(xì)胞）增殖失控、分化障礙及凋亡受阻，蓄積于骨髓及其他造血組織中，從而抑制骨髓正常造血并浸潤淋巴結(jié)、脾臟等器官，根據(jù)分化程度及自然病程可分為急性和慢性兩大類。多數(shù)急性白血病患者在經(jīng)過化療誘導(dǎo)和鞏固治療后可達(dá)到完全緩解，但相當(dāng)一部分患者在數(shù)月至數(shù)年內(nèi)仍會復(fù)發(fā)。PML-RARa融合基因陽性的急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL）除外，全反式維A酸（ATRA）的應(yīng)用使患者預(yù)后得到巨大改善，Adès L等人指出APL患者使用ATRA+柔紅霉素+阿糖胞苷強(qiáng)化治療后2年無病生存率可達(dá)93%[2]。
NCCN指南根據(jù)細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)將急性髓系白血?。ˋML）分為低危、中危及高危組。低危組AML患者在大劑量阿糖胞苷鞏固強(qiáng)化治療后繼續(xù)行維持化療，其無病生存率（DFS）可達(dá)到50~60%，且治療相關(guān)死亡率僅為8~10%[3]。EORTC/GIMEMA試驗(yàn)中指出接受allo-HSCT和auto-HSCT的兩組中危AML患者的長期存活率相當(dāng)，分別為62%、66%，而移植相關(guān)死亡率（TRM）分別為17%、6%[4]，allo-HSCT組的TRM明顯高于auto-HSCT，故認(rèn)為低危AML患者不宜選擇行allo-HSCT治療，可選擇auto-HSCT或者維持化療。
接受維持化療的中危患者5年總生存率（OS）只有24%，而行allo-HSCT及auto-HSCT的患者5年DFS分別為48.5%、45.2%[4]，F(xiàn)arag等人[5]的研究中比較了auto-HSCT和大劑量阿糖胞苷兩組的5年DFS，其分別為41%、45%，故allo-HSCT、auto-HSCT及大劑量阿糖胞苷化療5年DFS相差不大，均可作為中危患者緩解后的一線治療，臨床上可根據(jù)中危AML患者綜合考慮。
臨床上認(rèn)為急性淋巴細(xì)胞白血病患者不宜行auto-HSCT治療。在MRC UKALLⅫ/ECOG E2993臨床研究中，將無合適異基因供者的患者分為auto-HSCT及化療組，前者的5年總生存率（37%）明顯低于后者（46%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[6]。如果能找到合適的異基因供者，可首選allo-HSCT治療。
2淋巴瘤
淋巴瘤（lymphoma）是源于淋巴結(jié)和淋巴組織的免疫系統(tǒng)惡性腫瘤，根據(jù)組織病理學(xué)改變分為霍奇金淋巴瘤（HL）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）兩類?；羝娼鹆馨土鍪悄壳爸委熜Ч^好、治愈率較高的惡性腫瘤，通過ABVD等方案化療聯(lián)合放療，患者可良好獲益。
常規(guī)化療可使50~70%的NHL患者獲得完全緩解，但僅有30%可長期無病生存，尤其是對于復(fù)發(fā)難治、高度惡性的NHL患者療效欠佳。Philip的研究中將對化療敏感的109例NHL復(fù)發(fā)患者分為auto-HSCT組和常規(guī)化療組，auto-HSCT組的5年DFS及OS分別為46%、53%，而常規(guī)化療組僅為12%、32%，明顯低于auto-HSCT組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[7]。一項(xiàng)Ⅲ期前瞻性隨機(jī)試驗(yàn)SWOG S9704中將IPI評分高的彌漫侵襲性NHL患者隨機(jī)分為兩組，分別為6周期CHOP方案化療加auto-HSCT、8周期CHOP方案化療，因相關(guān)研究顯示加用利妥昔單抗（美羅華）能明顯提高CD20+的B細(xì)胞淋巴瘤患者的OS及DFS，故兩組中的相應(yīng)患者采用RCHOP方案化療，結(jié)果表明兩組的2年DFS分別為69%、56%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[8]。綜上所述，治療失敗的NHL患者及復(fù)發(fā)難治性NHL患者的標(biāo)準(zhǔn)治療方案為大劑量化療聯(lián)合auto-HSCT，具有高危因素的CR1期患者的鞏固強(qiáng)化治療也可采用。
3多發(fā)性骨髓瘤
多發(fā)性骨髓瘤（MM）是一種骨髓中單克隆漿細(xì)胞大量增生，并分泌單克隆球蛋白，引起貧血、高鈣血癥、腎功能不全和骨病等臨床表現(xiàn)的疾病。
NMSG94、MRCM Ⅶ等多項(xiàng)研究得出auto-HSCT治療有效率明顯高于化療組，且無事件生存率及總生存期也明顯優(yōu)于化療組, NCCN指南中已將auto-HSCT作為年輕MM患者的標(biāo)準(zhǔn)一線治療方案[9]。但其生存曲線上不存在平臺期，故學(xué)者們提出雙次自體造血干細(xì)胞移植（tandem auto-HSCT）。薈萃分析顯示tandem auto-HSCT可提高M(jìn)M患者總的反應(yīng)率及無事件生存期，并不能延長總生存期[10]。進(jìn)一步分層分析，第1次移植未達(dá)到VGPR的患者可能于第2次移植后達(dá)到VGPR，而第1次已達(dá)到VGPR及以上的患者單次及雙次移植療效相當(dāng)[11]。且因新藥的臨床應(yīng)用，故認(rèn)為僅第1次移植中未達(dá)到VGPR的患者推薦行tandem auto-HSCT。
Allo-HSCT可能是MM唯一治愈方法，因其有移植物抗骨髓瘤效應(yīng)，但由于MM發(fā)病年齡偏大，重要臟器功能不全，且受供著來源及經(jīng)濟(jì)影響，故不作為一線治療方案。如何能減低預(yù)處理強(qiáng)度、降低移植相關(guān)死亡率，同時能保留allo-HSCT的GVM效應(yīng)，auto-HSCT序貫減低劑量allo-HSCT（auto-RIC-allo-HSCT）應(yīng)運(yùn)而生[12]。一項(xiàng)長期隨訪研究提示auto-RIC-allo-HSCT治療組的24月非復(fù)發(fā)死亡率稍高于單純auto-HSCT治療組，但其5年無病生存率及總生存率明顯高于auto-HSCT治療組[13]，故對于有條件的MM患者來說，auto-RIC-allo-HSCT治療是一個合適的選擇，有治愈MM的可能，值的進(jìn)一步探索及研究。
綜上所述，造血干細(xì)胞移植在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中的治療效果是肯定的，在某些疾病上已獲得非常好的療效。但如何提高患者移植前的緩解率、減少移植相關(guān)并發(fā)癥、延長無病生存時間及總生存期等問題還需廣大學(xué)者進(jìn)一步探索和研究。
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[關(guān)鍵詞] 骨組織工程；臍帶；間充質(zhì)干細(xì)胞
[中圖分類號] R329 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）10（c）-0195-02
骨折及骨科疾病是臨床中較為常見的病癥，為患者帶來了一定身體痛苦與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前臨床中針對骨折與骨科疾病的治療，主要采用自體移植、人工植入及異體移植等，但上述方式均存在一定缺陷。MSCs具強(qiáng)大的多向分化功能，能夠誘導(dǎo)分化成骨細(xì)胞，幫助提升骨折或骨科疾病的治療效果。在此背景下，對骨組織工程中臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行分析具一定現(xiàn)實(shí)意義。
1 MSCs的分離與培養(yǎng)
1.1 MSCs的分離
吉林大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院的楊晨[1]對MSCs的分離進(jìn)行了研究，首先在手術(shù)室收集得到足月分娩的、健康的、新鮮的胎兒臍帶，將其放于融入了濃度為0.1%雙抗的氯化鈉溶液中，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對臍帶進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞分離。其次，將臍帶取出，浸泡于酒精內(nèi)約5 min，后以碘酒進(jìn)行充分擦拭消毒，置于氯化鈉溶液下反復(fù)清洗，直至血塊完全沖掉。將臍帶剪至2 cm/段的大小，以鑷子固定住臍帶邊緣，用剪刀小心剔除臍帶外膜，將內(nèi)含的華氏膠組織分離出來。取膠完成后接著剔除臍帶內(nèi)的血管，再次以氯化鈉溶液沖洗，或直接在融入了濃度為0.1%雙抗的氯化鈉溶液中進(jìn)行，以保證操作的無菌性。
1.2 MSCs的培養(yǎng)
武漢大學(xué)中南醫(yī)院的胡培[2]等人對MSCs的分離、培養(yǎng)進(jìn)行了研究，其MSCs分離操作與楊晨基本相同，華氏膠組織成功分離后，將其放入α-MEM培養(yǎng)液（內(nèi)涵100 U/mL鏈霉素與青霉素、10%胎牛血清）中，在CO2濃度為5%、箱內(nèi)溫度為37℃的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長情況，以0.25%胰蛋白酶進(jìn)行傳代培養(yǎng)。北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院的李鐸[3]選擇將切成管狀的臍帶繼續(xù)切片，再將片狀臍帶組織切割致2～3 mm3，利用吸管逐一將碎狀臍帶組織植入T75培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)瓶已預(yù)先由D/F12培養(yǎng)基（內(nèi)含有濃度為20%的FBS）包被完成，植入密度為每瓶20～25塊碎狀臍帶組織；再將培養(yǎng)瓶置于溫度為37℃，CO2濃度為5%的溫箱中，定時向箱內(nèi)補(bǔ)充培養(yǎng)基（1 mL/d），每隔3 d全量換液。
哈爾濱第五醫(yī)院手外科分院的聶廣辰[4]等人對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長曲線的繪制進(jìn)行了研究，在細(xì)胞傳代培養(yǎng)至第3代時將其分別種植于6孔板的其中4孔中持續(xù)培養(yǎng)8 d，按MTT法對細(xì)胞的增值情況進(jìn)行測定，當(dāng)細(xì)胞增值密度飽和，細(xì)胞進(jìn)入平頂期時停測。卓峰等人[5]在細(xì)胞增殖特定于曲線繪制的研究中提出，現(xiàn)階段培養(yǎng)MSCs普遍采用的方法包括酶消化法與培養(yǎng)法，對MSCs細(xì)胞進(jìn)行初代培養(yǎng)，該過程消耗約2 w，當(dāng)細(xì)胞融合率致80%時開始傳代培養(yǎng)，在細(xì)胞種植2～4 d時增殖趨勢最盛，傳至第15代時增殖速度開始減慢，至20代時增殖基本結(jié)束。早期的細(xì)胞增殖的潛伏期在植入后的36 h內(nèi)，之后開始了成對增長（5～6 d），增殖密度達(dá)到飽和后進(jìn)入到平頂期，綜上可知細(xì)胞增殖曲線呈“S”型。
2 MSCs的特征
2.1 細(xì)胞形態(tài)與生長特征
第二軍醫(yī)大學(xué)的胡凱猛[6]在顯微鏡下對MSCs的形態(tài)進(jìn)行觀察，按貼塊法獲取初代細(xì)胞后對其進(jìn)行種植，4～5 d后即可在貼塊下方觀察到沿瓶底生長的hUMSCs，種植7 d后能夠觀察到細(xì)胞數(shù)量不斷增多，主要呈小梭形及小三角形，繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞漸成集落狀生長，且生長狀態(tài)較為均衡，邊界清晰，伴有生長暈。酶消化法培養(yǎng)下初代細(xì)胞生長速度較培養(yǎng)法快，通常2～3 d后即在瓶底出現(xiàn)細(xì)胞，7 d后由小梭形及小三角形變?yōu)槎嘟切?、紡錘形，且生長迅速，集落生長呈緊靠型。14～15 d后達(dá)到約85%的融合。MSCs胞漿較少，小梭形的形態(tài)較為顯著，細(xì)胞核周的顆粒物質(zhì)較少，消化傳代完成后細(xì)胞解除集落樣生長，且分布均勻。
2.2 細(xì)胞免疫學(xué)特征
呂鵬飛等人[7]在關(guān)于細(xì)胞免疫學(xué)特征的研究中提出，MSCs的免疫學(xué)優(yōu)勢顯著，主要表現(xiàn)在其可以脫離免疫抑制作用而沖破MHC屏障，將細(xì)胞植入遠(yuǎn)交動物體內(nèi)。在UCMSC的免疫學(xué)特征分析中，證實(shí)其對人外周血單核細(xì)胞、鼠脾細(xì)胞及純化T細(xì)胞等免疫細(xì)胞具有抑制作用，從而減緩其增殖速度。毛希宏[8]的相關(guān)研究證明MSCs表面的抗原存在非專一性，主要包括細(xì)胞因子與生長因子受體類、粘附分子類、整和素家族成員類與其他分子類等四大類，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明UCMSCs中，CD29、CD73、CD44、CD13、CD105的陽性率超過90%，而CD134、CD45、CD11b則為陰性，在23代內(nèi)的傳代培養(yǎng)中，各類細(xì)胞因子無明顯差異，證明UCMSCs在經(jīng)過多代培養(yǎng)之后免疫學(xué)性質(zhì)較為穩(wěn)定。
2.3 細(xì)胞的誘導(dǎo)分化特征
hUCMSC的誘導(dǎo)分化能力較強(qiáng)，能夠?qū)崿F(xiàn)多向分化，包括內(nèi)胚層、中胚層與外胚層。在張亞斌等人[9]的細(xì)胞誘導(dǎo)分化體內(nèi)研究中，證實(shí)hUCMSC能夠分化成為內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼細(xì)胞、多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等，而在細(xì)胞誘導(dǎo)分化體外研究中，還發(fā)現(xiàn)hUCMSC可分化為成骨細(xì)胞、肝細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、胰島樣細(xì)胞、生殖細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等，在研究hUCMSC分化成為成骨細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)在誘導(dǎo)過程中hUCMSC的ALP活性提升，且鈣結(jié)節(jié)與鈣沉積現(xiàn)象明顯，證明其具成骨細(xì)胞的誘導(dǎo)潛能。上述研究結(jié)果表明，hUCMSC誘導(dǎo)分化功能強(qiáng)大，在臨床中的應(yīng)用價(jià)值與應(yīng)用范圍明顯優(yōu)于造血干細(xì)胞。
3 討論
骨組織工程是近年來臨床新興的學(xué)科，其中胚胎干細(xì)胞作為骨組織工程研究的熱點(diǎn)與重點(diǎn)，受到了臨床醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。通過上述研究可知，MSCs分化潛能較高，在軟骨、成骨、韌帶、肌腱、肌肉、神經(jīng)、心肌、肝等組織中均具誘導(dǎo)分化潛能，臨床應(yīng)用前景廣闊。李素萍等人[10]相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下，MSCs能夠沿培養(yǎng)瓶進(jìn)行增值，可以表達(dá)CD44、CD105及CD90，但不能表達(dá)HLA-DR、CD34及CD45，在體外培養(yǎng)時表現(xiàn)出成骨細(xì)胞的誘導(dǎo)分化潛能。
在此背景下通過改進(jìn)現(xiàn)有MSCs誘導(dǎo)分化為成骨或軟成骨細(xì)胞的培養(yǎng)方式，或在已知干細(xì)胞的基礎(chǔ)上找尋新型干細(xì)胞，以提升胚胎細(xì)胞在骨組織工程研究中的合適度，成為目前國內(nèi)外相關(guān)研究的探索目標(biāo)。在現(xiàn)代生物科技快速發(fā)展的時代背景下，學(xué)者們一定可以尋找到理想的培養(yǎng)途徑或干細(xì)胞類型，不斷推動骨組織工程的發(fā)展前進(jìn)。
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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrowmesenchymalstemcell,MSC)是存在于骨髓中的具有高度自我更新能力和多相分化潛能的成體干細(xì)胞,又稱骨髓基質(zhì)干細(xì)胞、間充質(zhì)祖細(xì)胞。
1MSC的生物學(xué)特性
MSC具有高度自我更新能力和多相分化潛能,體外培養(yǎng)的MSC有快速黏附和克隆能力,可以在體外培養(yǎng)20~25代而沒有形態(tài)、生長曲線和免疫表型的明顯改變,且保持著細(xì)胞的染色體核型和端?；钚?。MSC在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下,能夠向不同譜系的細(xì)胞分化,如成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌腱細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等[1]。
2MSC的免疫學(xué)特性
由于MSC不表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅱ分子、CD40、CD80、CD86
等共刺激分子,不表達(dá)或極低水平表達(dá)MHCⅠ分子,MSC不易被宿主T細(xì)胞識別,并能逃脫宿主免疫系統(tǒng)的排斥,因此認(rèn)為MSC具有低免疫原性。
3MSC在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
3.1MSCs用于心血管疾病的治療機(jī)制當(dāng)MSCs移植到損傷的心肌局部后,MSCs能分化為心肌細(xì)胞系,表達(dá)心肌特異性蛋白質(zhì),包括:αactinin,troponinT,tropomyosin,myosinheavychainMHC,phospholamban,和其他的心肌特異性蛋白質(zhì)。更重要的是,在MSCs移植后的心肌組織中檢測到了connexin43,該種蛋白質(zhì)反映的是細(xì)胞之間的連接以及細(xì)胞與細(xì)胞之間的電偶聯(lián)。
3.1.1MSCs促進(jìn)缺血或梗死部位血管再生由于新生血管的生成,增加了梗死部位心肌的血供,通過挽救冬眠的心肌、減少肥大的心肌細(xì)胞的凋亡、幫助恢復(fù)損傷的基質(zhì)來減少心室的擴(kuò)張和改善心功能。
3.1.2MSCs向收縮性心肌細(xì)胞分化細(xì)胞移植的最初目標(biāo)是所移植的細(xì)胞能取代死亡的可收縮的心肌細(xì)胞從而恢復(fù)心功能。
3.2MSCs移植治療腦梗死的可能機(jī)制
3.2.1刺激內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞和神經(jīng)祖細(xì)胞的增殖分化在正常情況下,中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)存在尚未激活的神經(jīng)元。腦缺血時,BMSCs可激活這部分神經(jīng)元,從而促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。
3.2.2MSCs自身分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞MSCs具有多潛能干細(xì)胞特性,在特定條件下可以打破胚層起源的限制向外胚層神經(jīng)元細(xì)胞和內(nèi)胚層肝卵圓細(xì)胞分化,發(fā)展為成熟神經(jīng)細(xì)胞,替代損傷細(xì)胞,重建神經(jīng)環(huán)路,從而達(dá)到恢復(fù)神經(jīng)功能的目的。大量體內(nèi)外試驗(yàn)研究顯示MSCs可分化為神經(jīng)樣細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。Woodbury等也證實(shí)大鼠及人的MSCs經(jīng)體外傳代后,在特定條件下可分化為神經(jīng)元。
3.2.3促進(jìn)血管生成,改善局部血液供應(yīng)MSCs靜脈移植入腦缺血大鼠模型后,發(fā)現(xiàn)大鼠缺血周邊區(qū)域有新生的血管生成,同時相應(yīng)部位血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的分泌和VEGF受體22的表達(dá)增加,提示MSCs有可能通過促進(jìn)新生血管生成實(shí)現(xiàn)來改善神經(jīng)功能的作用。
3.3骨髓干細(xì)胞介導(dǎo)腎臟再生研究
3.3.1由MSC分化形成2004年Marina等研究了MSC對急性腎衰竭時腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞的修復(fù)及腎功能恢復(fù)的意義。他們利用抗癌藥物順鉑建立腎損傷模型,將轉(zhuǎn)保護(hù)性順鉑治療基因雄性小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞注射由順鉑引起腎功能缺陷和嚴(yán)重腎小管損傷的雌性小鼠。含有Y染色體的細(xì)胞定位在腎小管上皮層并表達(dá)Lensculinaris凝血素結(jié)合位點(diǎn),證明移植MSC可以修復(fù)受損腎臟并可分化為腎小管上皮細(xì)胞,從而恢復(fù)腎臟的組織結(jié)構(gòu)和功能。順鉑誘導(dǎo)腎小管損傷可以使MSC顯著增強(qiáng)促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞增生的能力。
皮膚細(xì)胞“變身”為血細(xì)胞
“血荒”是世界性臨床醫(yī)學(xué)中存在的一個問題，醫(yī)院用血頻頻告急，不少需要輸血的病人不得不苦苦等待，錯失了最佳治療時機(jī)。最近，一項(xiàng)醫(yī)學(xué)研究的新成果，為這些人帶來了希望。加拿大研究人員宣稱，他們繞過誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞，可以直接將人體的皮膚細(xì)胞變?yōu)檠杭?xì)胞，這種新方法不僅對于理解細(xì)胞分化及再生醫(yī)學(xué)研究有重要意義，而且它標(biāo)志了生命科學(xué)的一個重要里程碑。3年前，美國人和日本人分別繞開胚胎，直接將普通皮膚細(xì)胞轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞，已經(jīng)引起了轟動。如今加拿大人又繞開了干細(xì)胞，直接將皮膚細(xì)胞轉(zhuǎn)化為血液細(xì)胞。由于這種細(xì)胞本身早已發(fā)育成熟，它不再需要花時間進(jìn)行培養(yǎng)，因此這種方法更快捷、更實(shí)用。這樣就有望徹底解決病人用血問題，其意義將更大。例如，醫(yī)生們可以從白血病患者的身上提取皮膚細(xì)胞，直接將它轉(zhuǎn)變成熟、健康的血細(xì)胞，輸入患者自己的體內(nèi)，不用再擔(dān)心有任何排斥反應(yīng)或發(fā)生感染等并發(fā)癥；有RH、MNSSU、DUFFY等稀有血型的人也可以事先制造出一些“稀有血液”，以備日后自己或他人急用；那些因?yàn)槭中g(shù)或者貧血治療等需要血液的患者也能夠使用自己的皮膚供血。此外，這一研究成果還有一個重要的“潛在意義”，它或許意味著科學(xué)家可以利用皮膚細(xì)胞制造出其他成熟細(xì)胞，例如腦細(xì)胞等。如此一來，治療老年癡呆癥和帕金森綜合癥便有了新希望?！⊙芯咳藛T是如何使皮膚細(xì)胞變身的呢?簡單的過程如下：他們從各年齡段成年人以及新生嬰兒的皮膚上收集了皮膚纖維細(xì)胞，并讓這些纖維細(xì)胞感染一種植入了OCT4基因的病毒，這種基因是一種干細(xì)胞全能性基因，可將纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞，再將這些細(xì)胞置于含有多種細(xì)胞因子的特殊溶液中進(jìn)行培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，無論接受試驗(yàn)者的年齡多大，他們的皮膚細(xì)胞都可以被“改造”成血細(xì)胞，由此生成的血液祖細(xì)胞產(chǎn)生了血液所具有的3種細(xì)胞――白細(xì)胞、紅細(xì)胞以及血小板，而且都能夠發(fā)揮其應(yīng)有的功能。
皮膚細(xì)胞變?yōu)樯窠?jīng)細(xì)胞
2010年初，美國斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院研究人員宣布，他們在實(shí)驗(yàn)中繞過誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞這一步驟，首次直接將實(shí)驗(yàn)鼠皮膚細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)細(xì)胞。這項(xiàng)研究的意義是重大的，在醫(yī)學(xué)界是一個“巨大的飛躍”，它為研究腦細(xì)胞功能紊亂提供了新方法，科學(xué)家可能僅在實(shí)驗(yàn)室托盤中就能研究帕金森氏癥、阿爾茨海默氏癥或遺傳性精神病等病癥，找出引起這些疾病的原因，直接用患者自己的皮膚細(xì)胞來治療這些疑難雜癥。
皮膚細(xì)胞的“變身”是利用了一種名叫“慢病毒”的基因運(yùn)輸工具來完成的，這種“慢病毒”不像真正的病毒，對人體不會產(chǎn)生不利的影響，但它攜帶和轉(zhuǎn)化基因的能力卻很強(qiáng)。研究人員首先選擇了19個與細(xì)胞重組或神經(jīng)發(fā)展有關(guān)的基因作為候選基因，通過慢病毒將這些基因植入到實(shí)驗(yàn)鼠的皮膚細(xì)胞中。32天后，其中一些皮膚細(xì)胞開始向神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化。研究人員根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從19個候選基因中篩選出3個基因，再次利用慢病毒將它們轉(zhuǎn)入到小鼠尾部的皮膚細(xì)胞。一周內(nèi)，約20％的小鼠皮膚細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了神經(jīng)細(xì)胞，這些神經(jīng)細(xì)胞不但有神經(jīng)蛋白，而且可與實(shí)驗(yàn)中的其他神經(jīng)細(xì)胞形成突觸聯(lián)系。
【關(guān)鍵詞】流式細(xì)胞術(shù)；臨床；進(jìn)展
流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)是20世紀(jì)70年展起來的對單細(xì)胞定量分析的一種新技術(shù)。它借鑒了熒光標(biāo)記技術(shù)、激光技術(shù)、單抗技術(shù)和計(jì)算機(jī)技術(shù),具有極高的檢測速度與統(tǒng)計(jì)精確性,而且從單一細(xì)胞可以測得多個參數(shù),為生物醫(yī)學(xué)與臨床檢驗(yàn)提供了全新視角和強(qiáng)有力手段[1]。目前,隨著單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展,流式細(xì)胞儀檢測技術(shù)已經(jīng)廣泛使用在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐的各個方面,發(fā)揮著重要作用。本文就其在臨床上的應(yīng)用綜述如下。
1 流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用
FCM可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群分析,可同時檢測出一種或幾種淋巴細(xì)胞表面亞群分析,將不同的淋巴細(xì)胞亞群區(qū)分開來,并計(jì)算出它們相互間的比例。通過對患者淋巴細(xì)胞各亞群數(shù)量的測定了解淋巴細(xì)胞的分化功能,鑒別新的淋巴細(xì)胞亞群。更重要的是通過研究大多數(shù)疾病的特異性淋巴細(xì)胞亞群或某些細(xì)胞表面標(biāo)志的存在、缺乏、過度表達(dá)等,對一些疾病,如免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等診斷、治療、免疫功能重建和器官移植監(jiān)測等有重要的臨床意義。如HIV主要侵襲CD4+T細(xì)胞而導(dǎo)致CD4淋巴細(xì)胞減少,CD4/CD8淋巴細(xì)胞比值下降,為艾滋病的診斷和治療提供依據(jù)[2]。在其它免疫功能性疾病的診治方面如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的淋巴細(xì)胞變化可反映該病的活動情況和器官侵犯程度,伴有嚴(yán)重腎臟損害的SLE患者可出現(xiàn)低CD4+、高CD8+的現(xiàn)象[3]。此外,FCM可以用來進(jìn)行組織相容性抗原(HLA)群體分析;HLA-B27抗原陽性與強(qiáng)直性脊柱炎等一系列關(guān)節(jié)病有著不同程度的正相關(guān)。FCM應(yīng)用HLA-B27特異性單抗檢測抗原，其敏感性較傳統(tǒng)的微量細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)大大提高,同時多參數(shù)的熒光測定使我們能夠在特定的細(xì)胞亞群中分析HLA-B27[4-5],還可以利用FCM進(jìn)行移植配型移植后免疫狀態(tài)監(jiān)測。
2 流式細(xì)胞術(shù)在血液學(xué)中的應(yīng)用
血液系統(tǒng)腫瘤的診斷和治療 FCM通過對外周血細(xì)胞或骨髓細(xì)胞表面抗原和DNA的檢測分析，對白血病、淋巴瘤等各種血液病的診斷、預(yù)后判斷和治療起著舉足輕重的作用。FCM采用各種抗血細(xì)胞表面分化抗原的單克隆抗體，借助于各種熒光染料測定一個細(xì)胞的多種參數(shù)，以正確地判斷出該細(xì)胞的屬性。各種血細(xì)胞系統(tǒng)都具有其獨(dú)特的抗原，當(dāng)形態(tài)學(xué)檢查難以區(qū)別時，免疫表型參數(shù)對各種急性白血病、淋巴瘤的診斷和鑒別診斷有決定性作用，其診斷的準(zhǔn)確性可達(dá)到90%左右[5]。微小殘留病變(MRD)是白血病復(fù)發(fā)的主要根源,FCM能在患者緩解期檢測是否有殘留病變細(xì)胞，及早發(fā)現(xiàn)后采取措施避免復(fù)發(fā)。而且測定 DNA倍體和進(jìn)行細(xì)胞周期分析對指導(dǎo)白血病化療也有一定作用，不同的白血病患者或同一患者在不 同病期白血病細(xì)胞增殖狀況不同，定期了解細(xì)胞增殖情況采取相應(yīng)藥物可以提高療效。急性白血病的多耐藥基因(MDR)也常用FCM檢測，F(xiàn)CM特有的敏感性和特異性，用于檢測二氨基苯茚酮 mRNA的表達(dá)產(chǎn)物 P糖蛋白(Pgp)及其活性(作為藥物的排出泵，降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度)，可以更直接的反映耐藥程度。陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)是一種造血干細(xì)胞克隆病,細(xì)胞 CD55、CD59抗原表達(dá)減低是該病的一個特點(diǎn)。FCM采用熒光標(biāo)記的單克隆抗體對血細(xì)胞 CD59的表達(dá)做定量分析，可以協(xié)助臨床做出診斷并判斷疾病的嚴(yán)重程度。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。FCM通過某些熒光染料(吖啶橙等)與紅細(xì)胞中 RNA結(jié)合，定量測定網(wǎng)織紅細(xì)胞中 RNA，得到網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分比。有報(bào)道認(rèn)為[6]FCM比目測法的精確度更高。此外，F(xiàn)CM還可以測量出網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟度，對紅細(xì)胞增殖能力的判斷很有意義，為干細(xì)胞移植術(shù)后恢復(fù)的判斷、貧血的治療監(jiān)測、腫瘤患者放、化療對骨髓的抑制狀況等提供了依據(jù)。造血干/祖細(xì)胞計(jì)數(shù)造血干/祖細(xì)胞具有自我復(fù)制和多向分化潛能，是各種血細(xì)胞和免疫細(xì)胞的始祖。造血干/祖細(xì)胞計(jì)數(shù)對造血干細(xì)胞移植意義重大。CD34抗原是早期造血干/祖細(xì)胞的表面標(biāo)志，應(yīng)用 FCM分析、計(jì)數(shù) CD34 細(xì)胞已成為造血干/祖細(xì)胞移植、造血重建的重要指標(biāo)。由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白的表達(dá)水平的高低來判斷,FCM測定血小板膜糖蛋白的表達(dá)情況可以診斷血小板膜糖蛋白異常所致疾病,這類疾病很少見但病因明確,主要是GpⅡb/Ⅲa或GpⅠb/Ⅸ/Ⅴ缺陷所致。患者血小板膜GpⅡb/Ⅲa的缺乏,導(dǎo)致血小板聚集功能明顯低下,這就是常染色體隱性遺傳病-血小板無力癥。而巨血小板綜合征是由于GpⅠb/Ⅸ/Ⅴ復(fù)合物數(shù)量或質(zhì)量的缺陷導(dǎo)致的遺傳性出血性疾病。FCM還可以通過單抗免疫熒光標(biāo)記血小板膜糖蛋白監(jiān)測血小板功能及活化情況,評價(jià)活化血小板程度在血栓性疾病和血栓前狀態(tài)發(fā)生發(fā)展中的作用,有利于血栓栓塞性疾病的診斷和治療,此外血小板活化時細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度是活化血小板監(jiān)測的一項(xiàng)非免疫性指標(biāo),免疫性血小板減少性紫癜患者血漿中可產(chǎn)生血小板自身抗體,結(jié)合在血小板表面,稱為血小板相關(guān)抗體,檢測血小板表面或血清中的相關(guān)抗體,可用于該病的診斷及治療監(jiān)測[7]。
3 流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用
FCM在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用主要是利用DNA含量測定進(jìn)行包括癌前病變及早期癌變的檢出、化療指導(dǎo)以及預(yù)后評估等工作,FCM可精確定量DNA含量,能對癌前病變的性質(zhì)和發(fā)展趨勢做出判斷,有助于癌變的早期診斷[6]。首先需要把實(shí)體瘤組織解聚、分散制備成單細(xì)胞懸液,用熒光染料(碘化吡啶P1)染色后對細(xì)胞的DNA含量進(jìn)行分析,將不易區(qū)分的群體細(xì)胞分成三個亞群(G期、S期、G2期),DNA含量直接代表細(xì)胞的倍體狀態(tài),非倍體細(xì)胞與腫瘤惡性程度有關(guān)。DNA非整倍體細(xì)胞峰存在可為腫瘤診斷提供有力依據(jù)[6]。腫瘤細(xì)胞DNA倍體分析對患者預(yù)后的判斷亦有重要作用。異倍體腫瘤惡性病變的復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率及死亡率均較高,而二倍體及近二倍體腫瘤的預(yù)后則較好。FCM不僅可以對惡性腫瘤DNA含量進(jìn)行分析,還可根據(jù)化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化去評估療效,了解細(xì)胞動力學(xué)變化,對腫瘤化療具有重要的意義。臨床醫(yī)師可以根據(jù)細(xì)胞周期各時相的分布情況,依據(jù)化療藥物對細(xì)胞動力學(xué)的干擾理論,設(shè)計(jì)最佳治療方案。從DNA直方圖直接地看到腫瘤細(xì)胞的殺傷變化,及時選用有效的藥物對腫瘤細(xì)胞達(dá)到最大的殺傷效果。
4 流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞凋亡和多藥耐藥基因中的應(yīng)用
細(xì)胞凋亡是機(jī)體生長發(fā)育、細(xì)胞分化和病理狀態(tài)中細(xì)胞死亡的過程,凋亡典型的形態(tài)特征是核染色質(zhì)固縮并分離,細(xì)胞質(zhì)濃縮,細(xì)胞膜和核膜皺曲,核斷裂形成片斷,最后形成數(shù)量不等的凋亡小體。FCM可以進(jìn)行DNA含量分析,通過二倍體細(xì)胞G0/G1期峰前的亞二倍體峰來確定。在凋亡早期,一些與膜通透性改變及凋亡有關(guān)的蛋白在細(xì)胞膜表面有特定表達(dá)。通過FCM結(jié)合單克隆抗體可以檢測表達(dá)這些蛋白的細(xì)胞,從而確定細(xì)胞的凋亡情況。多重耐藥性(multidrugresistance,MDR)是由多藥耐藥基因編碼的P糖蛋白(P-gp)親脂化合物,包括多種抗癌藥物和熒光染料的跨膜性排出泵。從人淋巴細(xì)胞排除熒光染料與細(xì)胞內(nèi)P-gp的含量直接相關(guān)。當(dāng)淋巴細(xì)胞出現(xiàn)MDR陽性細(xì)胞時,患者對化療藥物開始出現(xiàn)耐藥性,需要考慮其它治療方式。多藥耐藥是腫瘤患者化療失敗的主要原因,FCM對多藥耐藥基因(如P170)和凋亡抑制基因及凋亡活化基因表達(dá)的測定,可為臨床治療效果分析提供有力依據(jù)[8]。
5 流式細(xì)胞術(shù)在器官移植中的應(yīng)用
FCM在器官移植中占有重要地位,可被用來判斷供者與受者之間是否合適,用來鑒別和定型同種異體反應(yīng)抗體[6]。通過供者白細(xì)胞和受者的血清共同孵育,如果受者血清中存在針對供者的循環(huán)抗體,就會同供者的淋巴細(xì)胞結(jié)合,再加入熒光素標(biāo)記的二抗來顯示這種結(jié)合,此方法能在移植手術(shù)前發(fā)現(xiàn)高風(fēng)險(xiǎn)的受體。移植后免疫表型的監(jiān)測也很重要。FCM可用于檢測移植后血液或移植內(nèi)免疫成分的變化,以預(yù)防移植后免疫
排斥反應(yīng),細(xì)胞免疫抑制治療效果和移植存活情況,可敏感地預(yù)測排斥反應(yīng)的發(fā)生,為臨床治療提供有效依據(jù)。
6 流式細(xì)胞術(shù)在臨床細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)在臨床細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用具有快捷、靈敏,能同時進(jìn)行多參數(shù)分析等優(yōu)點(diǎn),可廣泛用于細(xì)菌、病原體、毒素和血清抗體及藥敏試驗(yàn)。免疫熒光檢測方法中的流式微球分析(CBA)是FCM的一個新應(yīng)用。這種方法也可用于真菌、寄生蟲、病毒以及這些病原體的混合感染的檢測。近年來,FCM與熒光染料的聯(lián)合運(yùn)用可判斷細(xì)菌的活力和功能狀態(tài),由于速度快,該方法已被建議作為臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)藥敏試驗(yàn)。FCM藥敏檢測方法較多,通過測量加入藥物孵育后的散射光的DNA含量來判斷抗生素對細(xì)菌的敏感性。該法現(xiàn)被認(rèn)為是FCM在該領(lǐng)域應(yīng)用的經(jīng)典方法[6]。
7 FCM在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用
在細(xì)胞周期內(nèi),DNA含量隨時相發(fā)生周期性的變化,通過熒光探針對細(xì)胞進(jìn)行相對DNA含量測定,可分析細(xì)胞周期各時相細(xì)胞的百分比,周期動力學(xué)參數(shù)以及DNA異倍體。可利用與鈣離子特異結(jié)合的熒光染料和激發(fā)光譜或發(fā)射光譜是pH值依賴熒光染料進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度測定和細(xì)胞內(nèi)pH值測定[9]。
8 流式細(xì)胞術(shù)在優(yōu)生遺傳領(lǐng)域中的應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)可使含量極微的胎兒有核紅細(xì)胞得到富集,因?yàn)橛泻思t細(xì)胞含有胎兒的全部基因,并具有不影響多胎妊娠等優(yōu)點(diǎn),結(jié)合FISH,PCR等技術(shù),使之具有應(yīng)用于無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的廣闊前景[10]。
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創(chuàng)傷是醫(yī)學(xué)中最古老又最新穎的課題。說它古老，因?yàn)樽杂腥祟惓霈F(xiàn)起就有了創(chuàng)傷；說它新穎，是因?yàn)榻鼛资陙?，隨著城市建設(shè)和交通的高速發(fā)展，以及汽車數(shù)量的急劇增加，創(chuàng)傷呈不斷增多之勢?，F(xiàn)全球每年因創(chuàng)傷致死者數(shù)百萬人，受傷數(shù)千萬人以上，故有人將創(chuàng)傷稱之為“發(fā)達(dá)社會疾病”，或稱“現(xiàn)代文明的孿生兄弟”。在美國，創(chuàng)傷是第4位死因，而20世紀(jì)初僅為第7位死因；在我國，創(chuàng)傷已成為城市中的第5位死因，農(nóng)村中為第4位死因。此外，創(chuàng)傷多發(fā)生在青壯年，對社會勞動力的影響很大，其潛在壽命喪失年數(shù)（指平均壽命與死亡時年齡之差，即YPLL）遠(yuǎn)大于其他疾病。由此可見，創(chuàng)傷對人類的生命健康和社會發(fā)展已構(gòu)成巨大威脅，應(yīng)當(dāng)引起全社會更多的關(guān)注。
1 創(chuàng)傷流行病學(xué)
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，創(chuàng)傷像肺癌、冠心病、瘧疾等疾病那樣，也有一定的流行病學(xué)規(guī)律可循。所有創(chuàng)傷，特別是交通傷，常好發(fā)于一定的人群，如一定的年齡、職業(yè)、性別、個人心理素質(zhì)、文化教養(yǎng)等，隨著研究的深入和拓寬，一門新的學(xué)科應(yīng)運(yùn)而生，這就是創(chuàng)傷流行病學(xué)。它是研究創(chuàng)傷發(fā)生、影響因素、流行規(guī)律和預(yù)防措施的一門分支學(xué)科［1］。
近年來，不少研究創(chuàng)傷流行病學(xué)的學(xué)者集中于調(diào)查和分析交通事故的好發(fā)因素，如人-車-路-環(huán)境間的平衡狀態(tài)，各個環(huán)節(jié)在造成車禍中的作用等。國內(nèi)外的統(tǒng)計(jì)資料表明，造成車禍的原因很多，但95%左右是人的因素，如司機(jī)過勞、駕車時精力不集中、開車前飲酒或服用興奮劑、超速開車、違章駕駛、行人不遵守交通法規(guī)等，共同的特點(diǎn)是安全意識淡薄。由此可見，提高所有道路使用者的交通安全意識，安全教育與懲罰相結(jié)合，就可大幅度減少車禍及其所致的傷亡。
另一項(xiàng)重要研究是探討某些人在生理、心理方面的缺陷而表現(xiàn)出來的一定事故傾向性。如能在考駕駛執(zhí)照時就進(jìn)行檢測，查出有事故傾向性的人，不發(fā)給駕駛執(zhí)照或進(jìn)行特殊培訓(xùn)，則可消除引起車禍的部分隱患。
2 道路交通傷
全球每年因交通事故致死人數(shù)約120萬人，受傷約3 000萬至5 000萬人。
WTO預(yù)計(jì)，至2020年，道路交通傷致死和致殘人數(shù)將增加60%，在全球疾病和傷害負(fù)擔(dān)（含早死和傷殘所致的壽命損失年數(shù)）中將由1990年的第9位躍升至第3位［2］。
行人、騎自行車者、摩托車手、電動自行車者受到的保護(hù)最少，是“易受傷的道路使用者”，歐洲的一項(xiàng)研究顯示，按出行公里數(shù)計(jì)算，與小轎車駕駛員死于車禍的可能性相比，騎自行車者是8倍，步行者是9倍，騎摩托車者是12倍［2］。
2004年，我國道路交通事故517 889起，死107 077人，傷480 864人，直接經(jīng)濟(jì)損失約24億元人民幣，萬車死亡率9.93人，10萬人口死亡率8.24人［3］，是車禍和死亡人數(shù)最多的國家。
近20年來，國內(nèi)交通醫(yī)學(xué)方面作了不少工作［4-7］，主要進(jìn)展有以下幾方面。
2.1 實(shí)驗(yàn)平臺 在第三軍醫(yī)大學(xué)交通醫(yī)學(xué)研究所建立了不同大小和功能的生物撞擊機(jī)實(shí)驗(yàn)平臺，可以做不同大小動物的交通傷模擬實(shí)驗(yàn)；2004年又建立了軌道式生物撞擊機(jī)實(shí)驗(yàn)室，可進(jìn)行實(shí)車碰撞，真實(shí)模擬乘員和行人的交通傷。
2.2 生物力學(xué) 先后對顱腦、胸部、腹部、脊柱等部位交通傷的生物力學(xué)機(jī)制進(jìn)行較廣泛的研究。提出了顱內(nèi)應(yīng)力集中和剪切力是引起顱腦損傷的主要原因；高速牽張變形致心臟破裂；剪切力致肺表面損傷；微血管擴(kuò)張性撕裂致肺內(nèi)出血；腹腔臟器不均勻性的相對位移和變形致臟器撕裂和肝內(nèi)血流壓力劇增，由此發(fā)生肝內(nèi)點(diǎn)片狀出血；此外，還揭示粘性標(biāo)準(zhǔn)（即軀干變形的瞬間速度V與壓縮程度C的最大乘積）與傷情的關(guān)系最為密切，兩者間呈“S”形曲線關(guān)系，粘性標(biāo)準(zhǔn)可作為有效的傷情指數(shù)和診斷指標(biāo)。
2.3 救治 1986年，政府公布“120”為全國統(tǒng)一的急救電話號碼，從而有效地提高了交通傷救治水平。全國各地參考國外急救醫(yī)療服務(wù)系統(tǒng)（EMSS）建立了急救網(wǎng)，除院前救治外，還強(qiáng)化了急診科救治和重癥監(jiān)護(hù)室救治，三個環(huán)節(jié)相互銜接。一些大醫(yī)院開展了“一體化”救治，提出入院后救治的“黃金1小時”和“鉑金10分鐘”的理念，從而提高了救治水平，但也存在不少問題，如院前急救網(wǎng)不夠健全，到達(dá)現(xiàn)場時間不夠快，急診科與各?？频年P(guān)系還不夠規(guī)范等等。
2.4 交通心理 主要研究駕駛員的知覺和認(rèn)知（如反應(yīng)時間、動態(tài)視覺、判讀距離、注意廣度等）、狀態(tài)（疲勞、精神壓力、清醒程度等）、事故傾向性（約6%～8%的駕駛員有事故傾向性，造成的車禍占30%～40%）等。
3 組織工程和組織修復(fù)
組織工程是近20多年來發(fā)展起來的一項(xiàng)新的醫(yī)療技術(shù)，它不僅提供了新的治療方法，而且提出了復(fù)制“組織”、“器官”的新理念。其基本原理是：從機(jī)體獲取少量活組織，將其中的功能細(xì)胞分離出來進(jìn)行體外培養(yǎng)擴(kuò)增，然后與可降解吸收的三維支架材料按一定比例混合，植入體內(nèi)病損部位，最后形成所需要的組織或器官，以達(dá)到創(chuàng)傷修復(fù)和功能重建的目的［8］。
動物實(shí)驗(yàn)顯示，應(yīng)用骨髓基質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損和應(yīng)用脂肪干細(xì)胞體外構(gòu)建軟骨等均獲得初步效果。臨床上，用患者自體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞作為種子細(xì)胞修復(fù)顱骨缺損、齒槽裂骨缺損、顱面部骨凹陷畸形及四肢骨缺損填充等也取得較為滿意的療效。組織工程化骨可在缺損區(qū)內(nèi)長期穩(wěn)定存在（隨訪3年以上），基本恢復(fù)了患區(qū)支撐、保護(hù)等原有功能［9］。組織工程皮膚已有數(shù)種商品，并已廣泛應(yīng)用于臨床［10，11］。實(shí)驗(yàn)顯示，在表皮、真皮及毛囊等部位均已成功分離培養(yǎng)出增殖力很強(qiáng)的皮膚干細(xì)胞。
用豬自體真皮成纖維細(xì)胞為種子細(xì)胞，也成功修復(fù)自體的肌腱缺損，其形態(tài)和功能與正常肌腱非常接近［9］。
最近研究還表明，成年人第二代真皮成纖維細(xì)胞與第二代肌腱細(xì)胞基因表達(dá)譜極其相似，從而提示今后有可能用成纖維細(xì)胞作為肌腱組織工程種子細(xì)胞以修復(fù)缺損的肌腱。
干細(xì)胞在組織修復(fù)中有重要作用。有證據(jù)表明，在皮脂腺、毛囊周圍的干細(xì)胞具有多潛能性，這類干細(xì)胞可遷移至毛囊以外產(chǎn)生新生的上皮，真皮中的某些干細(xì)胞可產(chǎn)生軟骨、肌肉、神經(jīng)元類的細(xì)胞。毛囊周圍的祖細(xì)胞在創(chuàng)傷時可變?yōu)槌衫w維細(xì)胞。肌肉的再生可來源于骨髓源性的多能干細(xì)胞及神經(jīng)干細(xì)胞。神經(jīng)干細(xì)胞可誘導(dǎo)成星形膠質(zhì)細(xì)胞，重建損傷前的微環(huán)境，也可誘導(dǎo)成少突膠質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)髓鞘的再形成。利用成體干細(xì)胞可塑性治療心肌梗死和下肢缺血性疾病已獲得初步成效［12］。
利用組織工程制成具有活性表皮和真皮結(jié)構(gòu)的復(fù)合皮膚。應(yīng)用脫細(xì)胞異體真皮作為支架，與網(wǎng)狀自體薄皮片復(fù)合移植，其皮片韌性、外觀收縮程度均較為理想［13］。
4 損傷控制手術(shù)
損傷控制手術(shù)（damage control operation， DCO）是近20年來提出并應(yīng)用的實(shí)用外科原則，其目的是穩(wěn)定傷情，避免生理潛能進(jìn)行性消耗，為確定性手術(shù)贏得時間。
大多數(shù)嚴(yán)重多發(fā)傷可按常規(guī)手術(shù)方式進(jìn)行，僅少數(shù)患者生理潛能臨近或已達(dá)到極限，雖然技術(shù)上可完成Ⅰ期修復(fù)和重建，但機(jī)體本身難以承受或環(huán)境不允許，此時需作DCO，適應(yīng)證的選擇取決于以下幾個方面。①環(huán)境因素：如前線手術(shù)隊(duì)或事故現(xiàn)場離大醫(yī)院很遠(yuǎn)。②生理潛能參數(shù)：如復(fù)蘇和手術(shù)時間＞90min；嚴(yán)重代謝性酸中毒pH＜7.30；體溫＜35℃；凝血機(jī)制紊亂或機(jī)械性出血；輸血量＞10單位。根據(jù)上述生理潛能參數(shù)作為DCO適應(yīng)證常為時已晚，故應(yīng)在這之前實(shí)施。③創(chuàng)傷類型：這是決定DCO的主要依據(jù)，如高動能軀干鈍性創(chuàng)傷；多發(fā)性軀干穿透傷；大血管伴多臟器傷；多體腔內(nèi)致命性大出血；復(fù)雜臟器損傷等［14］。
治療步驟如下：
4.1 急救手術(shù) 控制出血和感染，作胃小腸破裂修補(bǔ)，緊急時僅用鉗夾住空腔臟器破裂處、結(jié)腸造瘺等，簡易關(guān)閉胸腹腔。
4.2重癥監(jiān)護(hù) 手術(shù)后盡快送至重癥監(jiān)護(hù)室處理，主要任務(wù)是恢復(fù)血容量、復(fù)溫、糾正凝血機(jī)制紊亂、糾正代謝性酸中毒。
4.3 確定性手術(shù) 待生理功能基本恢復(fù)正常后，作確定性手術(shù)。
5 顱腦傷
最近美國國立神經(jīng)疾病與腦卒中研究所（NINDS）對大宗病例進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示，在谷氨酸受體拮抗劑、激素、自由基清除劑、鈣拮抗劑、生長激素/胰島素樣生長因子、緩激肽拮抗劑、抗癲癇藥等藥物都沒有對顱腦創(chuàng)傷有確切的臨床治療效果［15］。
目前認(rèn)為有希望的藥物包括：黃體酮、鎂離子、大劑量白蛋白和膽堿脂酶抑制劑——安理申等，但尚需大量臨床研究方可得出結(jié)論。
彌漫性軸索損傷（DAI）在重型顱腦損傷中發(fā)生率為28%～42%。創(chuàng)傷可引發(fā)非離斷性軸索損傷，胞漿蛋白降解酶如Calpain抑制劑能減少傷后軸索腫脹及繼發(fā)性斷離。
多中心前瞻性臨床對照研究發(fā)現(xiàn)，重型顱腦損傷合并惡性顱內(nèi)壓增高，標(biāo)準(zhǔn)外傷大骨瓣減壓既簡單又安全，療效優(yōu)于常用開顱骨瓣［16］。
顱腦傷后的繼發(fā)性損傷已引起廣泛重視。目前研究認(rèn)為，內(nèi)源性損害因子如乙酰膽堿、興奮性氨基酸、內(nèi)源性阿片肽、氧自由基以及炎癥反應(yīng)失控等是繼發(fā)性腦損害發(fā)生的主要機(jī)制。
已發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細(xì)胞在一定條件下能分化成神經(jīng)元，已有人從顱腦損傷病人的腦挫傷組織中分離出神經(jīng)干細(xì)胞，體外增殖后再輸入腦挫傷區(qū)，期望能促進(jìn)腦功能恢復(fù)［16］。
6 創(chuàng)傷骨折
6.1 骨折復(fù)位技術(shù)的發(fā)展 近年來AO學(xué)者提出的生物學(xué)固定新概念（biological osteosythesis，BO），已在我國創(chuàng)傷骨科界得到認(rèn)可，其主要內(nèi)容包括：①遠(yuǎn)離骨折部位進(jìn)行復(fù)位以保護(hù)骨折局部軟組織的附著；②不強(qiáng)求骨折的解剖復(fù)位，關(guān)節(jié)內(nèi)骨折仍要求解剖復(fù)位；③使用低彈性模量的內(nèi)固定物；④減少內(nèi)固定物與骨皮質(zhì)之間的接觸面積。在此理念的影響下，間接復(fù)位技術(shù)相應(yīng)問世，這一技術(shù)又被稱為韌帶整復(fù)術(shù)（ligamentotaxis）。由于骨端血供破壞少，骨愈合的速度較直視下的解剖復(fù)位明顯加快，這對粉碎性骨折尤為有利［16］。
6.2 骨折固定系統(tǒng)的發(fā)展 在BO概念指導(dǎo)下，配合間接復(fù)位技術(shù)，內(nèi)固定系統(tǒng)在材料和構(gòu)型上都有很大發(fā)展。低彈性模量固定物材料仍以鈦合金材料最為理想。
6.3 骨組織工程的研究 是組織工程研究領(lǐng)域中最為活躍的一部分，組織工程學(xué)的發(fā)展將為創(chuàng)傷骨科的臨床治療提供新的治療手段與技術(shù)。
7 結(jié)束語
創(chuàng)傷的基礎(chǔ)和臨床研究近年來均取得較大的進(jìn)展，但是距離保護(hù)人民健康的要求仍相差甚遠(yuǎn)。創(chuàng)傷，特別是交通傷，急劇增多的勢頭尚未得到有效的遏制。
應(yīng)當(dāng)強(qiáng)調(diào)，創(chuàng)傷在很大程度上是可以預(yù)防的，如果預(yù)防工作做得好，全民預(yù)防傷害的意識提高，創(chuàng)傷會大為減少。其次，創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)與諸多學(xué)科相互交叉，既涉及到預(yù)防醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)，又與醫(yī)學(xué)以外的其他學(xué)科密切相關(guān)，如能做到多學(xué)科的協(xié)作研究，特別是醫(yī)學(xué)和工程技術(shù)兩方面專家密切合作，必將會大大降低創(chuàng)傷的發(fā)生率和死亡率。
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踝前區(qū)的應(yīng)用解剖 藍(lán)順清，胡興宇
胸導(dǎo)管壺腹的形態(tài)學(xué)研究 鄒智榮，畢玉順，劉執(zhí)玉，周小龍，李貴寶，王偉
前列腺術(shù)前注藥及改良恥骨上經(jīng)膀胱前列腺摘除術(shù)初探 黃祥，格桑
基質(zhì)金屬蛋白酶與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移 劉智敏，王凡
5-羥色胺(5-HT)與胃粘膜損傷和修復(fù)關(guān)系的研究現(xiàn)狀 唐旭，王澤，鄧才寶，張?zhí)K
肥大細(xì)胞的異質(zhì)性 陳曉宇，賈友蘇
體質(zhì)人類學(xué)研究二十年及其啟示 胡興宇，藍(lán)順清
左側(cè)椎動脈起自主動脈弓一例 鄒智榮，陳紹春，李仲銘
隨想克隆 孫昭
多媒體技術(shù)在組織學(xué)教學(xué)中應(yīng)用 陳海英
《人體解剖學(xué)》教學(xué)中課堂氣氛的創(chuàng)立 董武忠，劉振遠(yuǎn)
淺析目標(biāo)教學(xué)中的課后補(bǔ)救 胡文禮
《人體解剖學(xué)》教學(xué)中板圖的應(yīng)用 劉振遠(yuǎn)，羅衛(wèi)民
中專解剖學(xué)教學(xué)中"雙差"生的思考與對策 易前忠，葉常青
臨床醫(yī)學(xué)?？破瘘c(diǎn)本科班《臨床應(yīng)用解剖學(xué)》教學(xué)探討 朱建華，洪永華，李克攻
教育改革淺見 黃啟林
護(hù)理專業(yè)《解剖學(xué)》學(xué)習(xí)成績的現(xiàn)狀與對策 潘玉康，雷秀兵
現(xiàn)代教育技術(shù)在人體解剖學(xué)教學(xué)中應(yīng)用的思考 馬大軍，雍劉軍，劉興國
人體斷層解剖學(xué)教學(xué)的探討 劉衛(wèi)華，劉興國，馬大軍，米永杰
談解剖教學(xué)中的學(xué)生能力培養(yǎng) 易前忠
解剖學(xué)有關(guān)口區(qū)的一些名詞概念的探討 雷秀兵，潘玉康，楊陽
擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)教學(xué)培養(yǎng)綜合能力 王小標(biāo)
我怎樣通過試講 蔣艷萍
繪圖法在解剖學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用 林達(dá)
如何配合"大局解小系統(tǒng)"教學(xué)制作示教標(biāo)本 宋濤，李貴寶
《心血管系統(tǒng)解剖》課件的制作和應(yīng)用 初國良，黃海，彭映基，汪華僑
結(jié)腸巨大囊腫伴先天性闌尾缺如一例 趙亮，董浩，胡乃文，劉執(zhí)玉，劉立平
“綱(功能)舉目(形態(tài))張”——組織學(xué)教學(xué)方法探討 彭彬，黃安培
組織學(xué)實(shí)驗(yàn)考試方法的探討 李中華
初生牛脊髓神經(jīng)細(xì)胞尼氏體硫堇——伊紅染色法 房麗華
家鼠類腎上腺嗜鉻細(xì)胞簡易染色法 李莉
普通墨汁對中、小血管行熒光染色 鐘瑞沖，林卡莉
用撕片法顯示胎兒小腸壁外縱肌外側(cè)面微血管分布 李銀生，汪艷麗
血液涂片Wright染色法的改進(jìn) 陳大堤
硫堇塊染色法顯示神經(jīng)元尼氏體的體會 孫萬彬，趙春芳，谷雙魁，趙京山
采用犀牛牌雙面不銹鋼刀片制作石蠟切片 畢彥忠，陳福來，羅英鐸
神經(jīng)纖維快速染色改良法 畢彥忠，金曉明，陳福來，黃琪，羅英鐸
影響人胚胎腦組織冷藏因素的研究 張華
潘氏細(xì)胞固定和染色法探討 閆愛華，任知春，任秀花
運(yùn)動神經(jīng)末梢顯示方法探討 閆愛華，任秀花，任知春
網(wǎng)織紅細(xì)胞的顯示及體會 任秀花，閆愛華，任知春
糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管鋪片技術(shù)的改進(jìn)及運(yùn)用 潘琳，盛瑞紅，彭俊云，周水平
骨磨片封片的探討 宋林，糜建紅
一種顯示網(wǎng)狀纖維的方法 廖大清，馬玉瓊，陳思秀
Mallory三色法在小腸染色上的應(yīng)用 陳思秀，廖大清，馬玉瓊
制作疏松結(jié)締組織教學(xué)鋪片的探索 馬玉瓊，陳思秀，廖大清
石蠟切片H-E染色法的經(jīng)驗(yàn)和體會 朱麗華，張麗敏，王春燕，孫孝庸
大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)連續(xù)切片顯示神經(jīng)核團(tuán) 陳德英
觀察大鼠胚胎心內(nèi)膜墊發(fā)育時的切面選擇 肖虹蕾，喻青
鋪片在結(jié)膜杯狀細(xì)胞研究中的應(yīng)用 佘振玨，柯碧蓮，周國民
不同組織固定液與巴氏染色法異染性現(xiàn)象 韓亞京
肥大細(xì)胞數(shù)量及脫顆粒變化在小鼠妊娠早期子宮中的觀察 呂丹瑜，楊京京，劉斌
10%福爾馬林與中爾馬林的比較 張寶元
改良潰變神經(jīng)纖維鍍?nèi)痉椒ń?jīng)驗(yàn)介紹 買鴻宴，楊立元，楊磊，雷季良
湖南侗族耳的活體觀測與研究 吳億中，皮建輝，何培森
復(fù)方丹參注射液對大鼠急性脊髓損傷后神經(jīng)再生的影響 劉德明，王文敏，劉曾旭，
下頜第一前磨牙根管系統(tǒng)和根尖孔解剖及臨床意義 張玉，鄧德華
以鎖骨內(nèi)側(cè)端最高點(diǎn)為標(biāo)志行右靜脈角部穿刺的應(yīng)用解剖 孫國剛，劉玉林，聶紅藝，屈強(qiáng)
肌性動脈內(nèi)彈性膜的觀察分析 程基焱，劉廣益，吳雨嶺，先雄兵
MERlIN的分子結(jié)構(gòu)及特性 陳永鋒，齊建國，章為
胰島素樣生長因子對神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響 龍庭鳳，劉廣益，郭勇，余鴻
雙側(cè)巨輸尿管畸形一例 楊朝鮮，曾昭明
干細(xì)胞調(diào)控機(jī)制及體外培養(yǎng)影響因素的研究 何紅媛，王萍，夏冬，吳紹華
足內(nèi)側(cè)皮瓣的解剖學(xué)研究及臨床應(yīng)用 楊開明，徐達(dá)傳
針刺鎮(zhèn)痛及其機(jī)理 柯青，王廷華，趙有成
淋巴細(xì)胞歸巢至腸粘膜組織的分子機(jī)理 吳琦，張立平
探索調(diào)控人胚分化發(fā)育相關(guān)基因的時空表達(dá) 歐陽秋明，曾蘇，孟珊珊
中樞多巴胺系統(tǒng)與阿爾茨海默病 侯海龍，陳曉蓉，胡祥友
心肌細(xì)胞凋亡與高血壓 金迅，靳秋月，何文彤
急性脊髓損傷后aFGF、bFGF的表達(dá) 李衛(wèi)峰，王瑋
超聲檢測妊娠中胎兒的標(biāo)準(zhǔn)化問題 楊太珠，賀延富，羅紅，郭文琪，孫昭
談解剖學(xué)教學(xué)中的正遷移 吳仲敏
用三種軟件編制解剖學(xué)電子講稿的體會 伍家農(nóng)，張光鵬
關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞術(shù)；臨床醫(yī)學(xué)；應(yīng)用
近年來，隨著單克隆抗體的應(yīng)用及流式細(xì)胞術(shù)的快速發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)（FCM）已成為許多疾病診斷和分性的重要依據(jù)。流式細(xì)胞術(shù)是20世紀(jì)70年展起來的一項(xiàng)高新技術(shù)，它作為一門生物檢測技術(shù)集計(jì)算機(jī)技術(shù)、測量技術(shù)、激光技術(shù)、流體動力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體，是對快速直線運(yùn)動狀態(tài)中的細(xì)胞、生物顆?；蛞后w中的大分子物質(zhì)進(jìn)行多參數(shù)的、快速的定量分析和分選的一種技術(shù)［1］。1973年美國BD公司推出全國第一臺流式細(xì)胞儀，通過對流動液體中排列成單列細(xì)胞或顆粒進(jìn)行逐個檢測得到該細(xì)胞或顆粒的光散射和熒光指標(biāo)，分析它們的體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學(xué)性質(zhì)，還能對所需要的細(xì)胞進(jìn)行分選等。具有檢測速度快、測量指標(biāo)多、采集數(shù)量大，對所需的細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行分析或分選等特點(diǎn)［2］，其在生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、遺傳免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等眾多研究領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
1流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)及工作原理
1．1流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)
主要由五部分組成：（1）流動室及液流驅(qū)動系統(tǒng)；（2）激光光源及光束形成系統(tǒng)；（3）光學(xué)系統(tǒng)；（4）信號檢測與儲存、顯示、分析系統(tǒng)；（5）細(xì)胞分選系統(tǒng)。
1．2流式細(xì)胞儀的工作原理
將待測細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液，用一定壓力將待測樣品壓入流動室，不含細(xì)胞的硫酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣鞘液就能夠包繞樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細(xì)胞在鞘液的包繞下單行排列，依次通過檢測區(qū)域。流式細(xì)胞儀通常以激光作為光源，經(jīng)過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光，這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收，光散射信號在前向小角度進(jìn)行檢測，這種信號基本上反映了細(xì)胞體積的大??；熒光信號的接受方向與激光束垂直，經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不同波長的熒光信號，這些熒光信號的強(qiáng)度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號，再通過模／數(shù)轉(zhuǎn)換器將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識別的數(shù)字信號，計(jì)算機(jī)系統(tǒng)將這些數(shù)字信號收集、儲存，以一維直方圖或二維點(diǎn)陣圖及數(shù)據(jù)表或三維圖形顯示出來，可以用不同的標(biāo)記物進(jìn)行雙參數(shù)、三參數(shù)甚至多參數(shù)的分析［3，4］。
2流式細(xì)胞儀的技術(shù)指標(biāo)
包括：（1）分析速度：很高可以達(dá)到5000個／s左右，大型的流式細(xì)胞儀的分析速度可達(dá)10000個／s；（2）熒光檢測靈敏度：單個細(xì)胞上的熒光分子＜600個，或兩個細(xì)胞之間的熒光差＞5％就能區(qū)分；（3）前向角散射光檢測靈敏度：一般的可以檢測到的最小顆粒直徑在0．2～0．5μm；（4）分辨率（CV）：一般流式細(xì)胞儀能夠達(dá)到＜2．0％；（5）分選速度：一般流式細(xì)胞儀分選速度＞100個／s，分選細(xì)胞純度可達(dá)99％［5］。
3流式細(xì)胞術(shù)在臨床中的應(yīng)用
3．1在血液學(xué)中的應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)通過對外周血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞表面抗原和DNA的檢測分析對各種血液病如白血病、淋巴瘤等血液系統(tǒng)疾病的分型、診斷、治療及預(yù)后判斷均有重要作用。血細(xì)胞在白細(xì)胞系、紅細(xì)胞系、巨核細(xì)胞系、血小板及非造血細(xì)胞均有不同的分化抗原表達(dá)，分布在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜中。血液腫瘤細(xì)胞的特征是喪失了正常細(xì)胞的系類專一性和分化階段的規(guī)律性，運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)將具有系列特異性并涵蓋不同分化階段的單克隆體作為分子探針來檢測血液腫瘤細(xì)胞的內(nèi)外抗原，可以反映其本質(zhì)上與正常造血細(xì)胞的差異［6］。流式細(xì)胞術(shù)采用各種抗血細(xì)胞表面分化抗原的單克隆抗體，借助于各種熒光染料（異硫氰基熒光素FITC，藻紅蛋白PE等）測定一個細(xì)胞的多種參數(shù)，以正確判斷出該細(xì)胞的屬性。流式細(xì)胞術(shù)還可以應(yīng)用在白血病免疫分型方面，目前國內(nèi)外均主張采用FCMCD45／SSC雙參數(shù)散點(diǎn)圖設(shè)計(jì)方法進(jìn)行白血病免疫分析。采用此法可將骨髓細(xì)胞清晰地分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、成熟粒細(xì)胞、幼稚細(xì)胞和有核紅細(xì)胞群，這樣可以排除正常細(xì)胞對免疫分型的干擾，從而提高免疫分析的準(zhǔn)確性，而且測量細(xì)胞一般在1～5萬個細(xì)胞，快速特異、準(zhǔn)確性好，并且能夠提供正常細(xì)胞在演變成惡性腫瘤過程細(xì)胞基因及抗原標(biāo)志發(fā)生變化的信息。而這種細(xì)胞的變化是常規(guī)FAB法所不能分辨的。這種分型對于治療方案的正確選擇與預(yù)后有著重要的意義同時也提供了可靠的依據(jù)［7］。近年研究發(fā)現(xiàn)，在臨床血液病檢測和診斷中診斷準(zhǔn)確率高達(dá)90％以上，與普通檢測法相比準(zhǔn)確率提高達(dá)20％［8］。流式細(xì)胞術(shù)可以通過某些熒光染料與紅細(xì)胞中的RNA結(jié)合，定量地測定網(wǎng)織紅細(xì)胞中的RNA，得到網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分比，從而準(zhǔn)確地反映骨髓造血功能。有作者報(bào)道FCM方法比目測法結(jié)果精確度更高［9］。此外FCM還可以測出網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟度，對紅細(xì)胞增值能力的判斷很有意義，為干細(xì)胞移植術(shù)后恢復(fù)的判斷、貧血的治療監(jiān)測、腫瘤患者放化療對骨髓的抑制狀況等提供依據(jù)。
3．2在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用主要是對腫瘤細(xì)胞DNA含量進(jìn)行測定，包括癌前病變及早期癌變的檢出，輔助腫瘤的早期診斷和鑒別診斷。不僅如此，還可以根據(jù)化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化評估療效，了解細(xì)胞動力學(xué)的變化。臨床醫(yī)生可根據(jù)各細(xì)胞周期各時相的分布情況，結(jié)合化療藥物對細(xì)胞動力學(xué)的干擾理論，設(shè)計(jì)最佳治療方案，再依照DNA直方圖直接地看到腫瘤細(xì)胞的殺傷變化，及時調(diào)整治療方案，選取有效藥物以使對腫瘤細(xì)胞達(dá)到最大的殺傷效果［10］。
3．3在免疫學(xué)中的應(yīng)用
利用抗原抗體特異性反應(yīng)的原理將流式細(xì)胞儀與單克隆抗體結(jié)合，對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)抗原、癌基因蛋白及膜受體進(jìn)行定量檢測，廣泛應(yīng)用于臨床，對人體細(xì)胞免疫功能的評估具有重要的意義。流式細(xì)胞術(shù)可進(jìn)行T、B和NK淋巴細(xì)胞水平的分析，還可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群的分析，區(qū)分不同的淋巴細(xì)胞亞群，計(jì)算其相互間的比例，進(jìn)而了解淋巴細(xì)胞的分化功能。更重要的是，通過研究大多數(shù)疾病的特異性淋巴細(xì)胞亞群，對一些疾病如免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等的診斷、治療、免疫功能的重建具有重要的指導(dǎo)意義。例如CD4是輔淋巴細(xì)胞，它是遲發(fā)性超敏反應(yīng)的啟動者，是促使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的輔細(xì)胞，也是抑制性T細(xì)胞的誘導(dǎo)細(xì)胞，而CD8是抑制性T細(xì)胞，是細(xì)胞毒性T細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞，是抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的抑制性細(xì)胞［11］。在許多免疫性疾病中，淋巴細(xì)胞亞群的增多與減少對疾病的發(fā)展具有重要的作用。如在先天性發(fā)育不良綜合征中FCM分析顯示外周血CD3TCD4＋和CD8＋T細(xì)胞均減少，在殘余T細(xì)胞中T細(xì)胞受體（TCR）αβ分子表達(dá)減少，γδ分子表達(dá)正常，CD4＋／CD8＋T細(xì)胞比例升高，隨著受累者年齡的增加CD8＋細(xì)胞數(shù)增多，而有些患者T細(xì)胞數(shù)量增加，最終可達(dá)正常［12］。流式細(xì)胞術(shù)還可以進(jìn)行HLA群體分析，在強(qiáng)直性脊柱炎患者中用流式細(xì)胞術(shù)檢測HLA－B27抗原陽性率高達(dá)92．6％，而且可以排除交叉反應(yīng)，提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性［13］。
3．4在中醫(yī)藥研究方面的應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)可用于單味中藥有效成分的作用效果測定分析。如研究復(fù)方苦參方劑對大腸癌LoVo細(xì)胞體外增值凋亡的影響中，分析DNA含量及細(xì)胞周期，結(jié)果顯示Lo－Vo細(xì)胞可檢測亞G1峰，凋亡率于對照組相對比例增高，細(xì)胞周期分析發(fā)現(xiàn)S期阻滯現(xiàn)象，表明復(fù)方苦參方劑具有一定的抑制腫瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用［14］。在慢性阻塞性肺疾病的肺氣虛證、肺陰虛證患者中CD4＋、CD4＋／CD8＋均降低，CD8＋升高，說明肺氣虛證與肺陰虛證患者均存在細(xì)胞免疫功能低下［15］。
3．5在細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)具有快速、靈敏、精確并能進(jìn)行多參數(shù)分析的特點(diǎn)，可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的診斷和藥敏實(shí)驗(yàn)，是研究細(xì)菌異質(zhì)性、細(xì)菌抗生素后效應(yīng)、多種病原菌混合感染等的有效方法。常用的為流式細(xì)胞術(shù)藥敏試驗(yàn)：檢測不同細(xì)菌時，根據(jù)藥物對細(xì)菌的作用機(jī)理選擇合適的熒光染料，通過細(xì)菌總體平均熒光強(qiáng)度束反映抗生素對細(xì)菌的抗菌活性，3h左右即可得出檢測結(jié)果，尤其適用于急需藥敏報(bào)告的重癥感染病菌的檢測。
3．6在血小板疾病診斷中的作用
血小板是止血機(jī)制中一個重要因素，其表面含有多種糖蛋白及各種受體，這些受體與相應(yīng)的配體相結(jié)合后，血小板被激活，并發(fā)生形態(tài)變化，血小板聚集和顆粒釋放等一系列反應(yīng)。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測血小板標(biāo)志物在許多血小板相關(guān)疾病的診斷上具有重要的臨床價(jià)值［16］。如GPⅠb／Ⅸ復(fù)合物先天缺陷導(dǎo)致巨大血小板綜合征；GPⅡb／Ⅲa復(fù)合物先天缺陷導(dǎo)致血小板無力癥［17］。在免疫性血小板減少性紫癜的患者中，F(xiàn)CM可以測定患者血液中的PAIgG、PAIgM、PAIgA，熒光陽性百分率的診斷效率為45．8％，平均熒光強(qiáng)度的診斷效率為72．5％，兩項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合的診斷效率為74．2％［18］；因此FCM檢測血小板抗體可用于免疫性血小板減少性紫癜的診斷及治療監(jiān)測。用FCM內(nèi)參定位法定量分析血小板微粒在血栓性疾病和血栓前狀態(tài)的發(fā)生發(fā)展中的作用，有利于血栓性疾病的診斷和治療。
3．7在相關(guān)疾病檢測中的應(yīng)用
質(zhì)量檢測是診斷男性不育癥的重要手段，由于檢測數(shù)低及主觀因素的影響，常規(guī)的檢查只能反映的形態(tài)特征和有限的功能，不能為生育能力提供準(zhǔn)確評估的依據(jù)，用FCM檢查可把定性的描述變成定量的研究，提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，可對進(jìn)行高通量、多參數(shù)分析，得到不同時期的細(xì)胞數(shù)據(jù)及形態(tài)指標(biāo)，對臨床診斷發(fā)生障礙的性質(zhì)、原因和程度提高了客觀依據(jù)，可對少、弱和無癥的判斷、治療及療效的觀察作出正確的評價(jià)，為客觀評價(jià)男性生育能力提供了有力的依據(jù)。用FCM檢測生精細(xì)胞凋亡情況是迅速、準(zhǔn)確、客觀、可靠地評估功能和男性生育力的新方法［19］。
3．8在器官移植中的作用
可用流式細(xì)胞術(shù)判斷供者與受者之間的配型是否合適。檢測受者血清中抗供者的抗HLA抗體，如果受者血清中存在針對供者的循環(huán)抗體，就會同供者的淋巴細(xì)胞結(jié)合，在加入熒光素的二抗來顯示這種結(jié)合，就可在移植前后發(fā)現(xiàn)高風(fēng)險(xiǎn)抗體，以判斷供者與受者之間是否合適。移植后的免疫表型監(jiān)測也很重要，移植后的CD4／CD8比值低下的患者排斥反應(yīng)發(fā)生較多，受者血清中產(chǎn)生抗供體細(xì)胞抗體預(yù)后較差，應(yīng)及時監(jiān)測以便進(jìn)行抗排斥的預(yù)防和治療［4］。綜上所述，流式細(xì)胞術(shù)是一種在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)、臨床及科學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用前景的細(xì)胞分析技術(shù)。它具有分辨率高、分辨細(xì)胞數(shù)量大、參數(shù)多、準(zhǔn)確性高、速度快等優(yōu)點(diǎn)。隨著流式細(xì)胞分析技術(shù)與方法的迅速發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)在臨床的應(yīng)用范圍也不斷拓展，并將成為推動臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要手段。
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皮膚美容自古有之。當(dāng)代皮膚美容始于20世紀(jì)60～70年代，20世紀(jì)70年代后期出現(xiàn)皮膚擴(kuò)張術(shù)、皮膚磨削術(shù)和化學(xué)剝脫術(shù)等，20世紀(jì)90年代中后期現(xiàn)代激光在皮膚美容中廣泛應(yīng)用。美容皮膚科學(xué)是祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)皮膚美容精華、醫(yī)學(xué)美學(xué)、皮膚科學(xué)與先進(jìn)美容技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。美容皮膚科學(xué)又是現(xiàn)代皮膚科學(xué)中不可缺少的重要組成部分，它豐富和發(fā)展了傳統(tǒng)的皮膚科學(xué)。
美容皮膚科學(xué)(Cosmetic dermatology)是一門以醫(yī)學(xué)美學(xué)為指導(dǎo)，皮膚科學(xué)為基礎(chǔ)，研究人體皮膚的機(jī)能與結(jié)構(gòu)，維護(hù)、改善、修復(fù)和塑造人體皮膚的健康與美的規(guī)律的美容醫(yī)學(xué)分支學(xué)科。它是美學(xué)、美容學(xué)與皮膚科學(xué)三者有機(jī)結(jié)合的產(chǎn)物，目的是為了提高人的生命活力與美感，提高人的生命質(zhì)量、生存質(zhì)量及生活質(zhì)量。美容皮膚科學(xué)既是美容醫(yī)學(xué)(cosmetic medicine)和醫(yī)學(xué)美容學(xué)(medicalcosmetology)的一個分支學(xué)科和重要的組成部分，也是皮膚科學(xué)的一個新的分支學(xué)科。它是結(jié)合醫(yī)學(xué)美容的方式來維護(hù)和增進(jìn)人體皮膚健與美的一門新的醫(yī)學(xué)分支學(xué)科。美容皮膚科學(xué)以皮膚科學(xué)為基礎(chǔ)，并吸收了中醫(yī)皮膚美容、皮膚外科、美容醫(yī)學(xué)其他分支學(xué)科的臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)及各種行之有效的物理、化學(xué)與藥物美容、心理美容等技術(shù)的豐富營養(yǎng)，使其賦予了新的內(nèi)涵。
2 美容皮膚科學(xué)治療方法的發(fā)展與挑戰(zhàn)
美容方法學(xué)是一項(xiàng)新的皮膚美容技術(shù)，它是由皮膚生理學(xué)、化妝品學(xué)及美容技藝學(xué)組成的一門新興學(xué)科，它不僅為患者提供了新的審美選擇，同時也為醫(yī)生提供擴(kuò)大就業(yè)的機(jī)會。下面將國內(nèi)外發(fā)展較快的美容治療學(xué)方法介紹如下：
2.1 肉毒桿菌毒素(BTX)：肉毒桿菌毒素是肉毒桿菌產(chǎn)生的毒素，是一種強(qiáng)烈的神經(jīng)毒素，其生物學(xué)作用是在神經(jīng)肌肉接頭處阻滯神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，從而用于治療各種痙攣、強(qiáng)直以及震顫性疾病。BTX在美容整形領(lǐng)域的應(yīng)用是由Carru thers(1992年)首先報(bào)道，在治療眼肌痙攣時皺眉紋也同時消除。2001年，自加拿大、美國、歐洲和日本相繼批準(zhǔn)肉毒毒素用于面部除皺以來發(fā)展很快，到2004年已成為美國整形外科醫(yī)生開展的占第一位的非手術(shù)治療項(xiàng)目。肉毒桿菌毒素(BTX)A和B已成功地使用于美容皮膚病和相關(guān)疾病的治療，如：多汗癥、炎性疾病、直腸病以及其他的癥候。BTX－A不僅有效地抑制了乙酰膽堿而且還抑制P物質(zhì)和谷氨酸鹽，因此可以治療不同類型的濕疹。由于這些機(jī)制BTX－A可以止癢用于治療單純苔蘚、水泡型手部濕疹。在美容治療中肉毒毒素是非常有效和安全的，但有注射時疼痛的副作用。4％利多卡因表面麻醉霜可緩解局部的疼痛，因此，在美容治療中提倡使用局部麻醉劑。肉毒毒素還被用來與其他治療方法聯(lián)合應(yīng)用，因其安全、有效、操作簡單、使用方便和副作用小的特點(diǎn)，一直有很高的滿意度，越來越受到廣大求美者和醫(yī)護(hù)人員的歡迎。但肉毒毒素的副作用也正在被重視，需要嚴(yán)格把握適應(yīng)證及藥物劑量和用藥頻率。
2.2 光動力療法(PDT)：光動力治療在不同的醫(yī)學(xué)專業(yè)領(lǐng)域的利用發(fā)展迅速，通過在皮膚病中有效地利用光生物學(xué)的光能量和分子氧，在組織光學(xué)中選擇性破壞病理細(xì)胞。最近發(fā)展了聯(lián)合局部的光增敏劑5－6氨基－γ－酮戊酸(ALA)或它的甲酯(MAL)誘導(dǎo)光敏化卟啉，后者不產(chǎn)生強(qiáng)烈的全身性光敏作用，并且易于進(jìn)入皮膚導(dǎo)致光激活。光動力治療中單線態(tài)氧取決于病變組織中所應(yīng)用光的劑量、濃度和局部的光敏(化)劑。局部光動力治療皮膚腫瘤性疾?。汗饣越腔?、Bowen's病、原位鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌，以及非新生物皮膚病局限性硬皮病、尋常痤瘡和病毒性疣。一般認(rèn)為PDT的作用機(jī)理是通過細(xì)胞毒性效應(yīng)導(dǎo)致腫瘤破壞或免疫調(diào)節(jié)的作用改善皮膚炎癥狀態(tài)8-93。在美國FDA已推薦用于光化性角化病，在歐洲不僅用于光化性角化病和基底細(xì)胞癌，還用于Bowen's病、銀屑病、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤和痤瘡，近年來又用于皮膚年輕化。它的優(yōu)勢是非侵襲性的靶向治療通過受累面積局部用藥和局部照射，很少有痛苦和不適。光動力療法(PDT)與5－δ氨基－γ－酮戊酸(ALA)結(jié)合使用在治療多種皮膚病中受到了醫(yī)生和患者的歡迎。光動力學(xué)療法(PDT)與5－δ氨基－γ－酮戊酸(ALA)使得許多皮膚病得到了明顯的改善，專家一致認(rèn)為ALA－PDT治療光化性角化病、淺表性基底細(xì)胞癌、光子嫩膚、痤瘡、脂性皮膚、酒渣鼻、鼻贅及常見的皮膚病是安全和有效的。光動力療法治療淺表的基底細(xì)胞癌(BCCs)、Bowen's病報(bào)道有效率達(dá)85％～90％，同時也是優(yōu)秀的美容治療。特別對老年患者效果更為突出，可能與他們活動量小有關(guān)。由于它的通用性、安全性、多效性及美容功能的優(yōu)勢，ALA－PDT將很快成為臨床應(yīng)用的主流。
2.3 非剝脫性的皮膚年輕化技術(shù)：非剝脫性激光技術(shù)包括激光、強(qiáng)脈沖光及射頻。近年來，激光美容因?yàn)榘踩陀行П辉絹碓蕉嗟那竺勒咚邮芎托刨嚒Ｃ}沖染料激光(532～595nm)可以改善皮膚的充血，減少淺表皮膚色素斑；二極管激光(Smooth Beam，1450nm)和Nd：YAG激光(Cool Touch，1320nm)換膚，通過選擇性破壞含水量多的真皮淺層，靶向?yàn)樗肿?，穿透力?qiáng)，引起細(xì)胞反應(yīng)以形成新的膠原，同時也有皮膚收縮作用，特別眼瞼部更為明顯。激光皮膚治療技術(shù)就是利用激光對病損組織進(jìn)行修復(fù)和皮膚整形的過程。激光不僅可治愈各種胎記，也能治療雀斑、文身、眼眉色斑、鮮紅斑痣及多種色素和血管類皮膚病(如：色素性蕁麻疹、下肢毛細(xì)血管擴(kuò)張、酒糟鼻等)。激光治療皮膚病具有出血少、不留瘢痕、安全無痛，復(fù)發(fā)率少等優(yōu)點(diǎn)，是一種比較理想的美容方法。
強(qiáng)脈沖光(IPLs)是一種有特殊波長的寬譜可視光，有較柔和的光熱效應(yīng)，在不損傷皮膚的前提下可以達(dá)到嫩膚、祛斑、除皺及脫毛的美容效果。作為一種利用光熱物理作用理論進(jìn)行嫩膚美容在美容界是一次技術(shù)革新，其令人矚目的臨床效果也逐漸被人們所接受。IPLs并不是單一波長的激光，而是為430～1200hm波段的強(qiáng)光，其作用機(jī)制是由于皮膚內(nèi)色素和血紅蛋白吸收較短波長強(qiáng)脈沖光最多，因此造成皮膚內(nèi)色素斑和擴(kuò)張血管(紅血絲)的溫度上升而被破壞，因而達(dá)到美白皮膚，祛除色素斑，消除擴(kuò)張的毛細(xì)血管的作用。而較長波段的強(qiáng)脈沖光可促進(jìn)皮膚的膠原增生，增加皮膚彈性，去除細(xì)小皺紋，收縮粗大毛孔。不僅可以治療皮膚毛細(xì)血管擴(kuò)張，對年齡性和日光性皮膚老化、色素斑等有著很好的治療作用，同時還可提高皮膚的彈性和細(xì)膩程度，恢復(fù)賦有活力的肌膚。近年來面部皮膚年輕化和IPLs儀器性能的改進(jìn)以及與激光相比的價(jià)格優(yōu)勢導(dǎo)致IPLs的普及使用，IPLs的使用可能超過激光。此外，IPLs抑制皮脂腺的分
泌，殺滅皮脂腺中的丙酸桿菌，促進(jìn)痤瘡瘢痕恢復(fù)，治療瘢痕可以減少紅斑、浸潤、炎癥及肥厚。其優(yōu)點(diǎn)是簡便、快捷，治療完成后可以立即恢復(fù)正常生活和工作。
射頻技術(shù)(radiofrequency－RF，Therma Cool技術(shù))，也稱為射頻電流，它是一種高頻交流變化電磁波的簡稱。每秒變化小于1000次的交流電，稱為低頻電流；大于10000次稱為高頻電流。RF就屬于高頻電流，由高頻電流轉(zhuǎn)化為熱能而起到美容作用。射頻能刺激真皮一膠原立即收縮，效果持久明顯。治療后，膠原連續(xù)增生，多數(shù)可持續(xù)3～6個月，甚至達(dá)18～24個月；使皮膚皺紋變淺，表面光滑且富有彈性，對于提升面部松弛，亞洲人效果更為滿意。臨床已證明射頻技術(shù)結(jié)合ELOS除皺改善面部皮膚年輕化是安全有效的，治療后，患者無需休息，不影響工作。2002年，Weiss 采用單極射頻RF配合冷凍劑使得面部皮膚緊致已治療10000多例，表明不用麻醉劑和鎮(zhèn)靜劑單極射頻RF用于面部緊致是安全的，副作用少，對面部年輕化與其他非侵蝕性設(shè)備相比RF副作用要小的多，并且有自其限性。
2.4 藥物美容學(xué)：它是在醫(yī)學(xué)人體審美的理論原則指導(dǎo)下，運(yùn)用藥物及中藥方劑、針灸、按摩、中藥護(hù)膚品等手段所進(jìn)行的美容。
皮膚增白藥物主要是通過干擾黑素的生物合成、減輕皮膚色素沉著而增白。按其作用機(jī)制又分為酪氨酸酶抑制型和非抑制型兩類。酪氨酸酶抑制型皮膚增白藥物包括單酚和多酚類(如：熊果苷，它是從杜鵑花科植物熊果的葉子中分離得到的一種具有脫色作用的單體物質(zhì)，能明顯抑制黑素細(xì)胞的酪氨酸酶活性和黑素產(chǎn)生)、銅離子螯合劑(曲酸及其酯化物等)、阻止酪氨酸酶向前黑素體轉(zhuǎn)移的藥物(葡萄糖胺類)、改變黑素體超微結(jié)構(gòu)的藥物(癸酸)、促進(jìn)酪氨酸酶蛋白降解的藥物(亞油酸、γ－亞麻酸)、競爭性酪氨酸酶抑制劑(氨甲環(huán)酸等)和其他類(胎盤提取物等)。非酪氨酸酶抑制型皮膚增白藥物包括抗壞血酸及其衍生物(抗壞血酸等)、角質(zhì)溶解劑(α－羥酸類等)、抑制黑素細(xì)胞增殖藥(內(nèi)皮素受體阻斷劑等)及其他類(過氧化氫等)。
肥胖采用藥物治療是重要的治療手段。目前治療肥胖癥的藥物主要有兩大類：作用于中樞的藥物(西布曲明)一食欲抑制藥和作用于外周的藥物(奧利司他)。超氧化物歧化酶(SOD)是一種極其有效的抗氧化劑，能抵御超氧陰離子自由基對細(xì)胞的破壞。研究顯示，SOD是人體內(nèi)最重要的酶之一，能有效清除超氧陰離子自由基，保持人體細(xì)胞膜年青、柔軟和健康的狀態(tài)。氫醌(HQ)的化妝品、粗制品及其活性成分的安全性一直存有爭議，氫醌在不超過2％的濃度時可作為一種脫色劑，因?yàn)閷ζ浣Y(jié)構(gòu)及不良反應(yīng)已了解較多，氫醌無疑是目前最有效而且最安全的脫色劑。現(xiàn)已有許多其他脫色劑不斷進(jìn)入市場，產(chǎn)品含有熊果苷、HQ和植物的類似物，包括含有天然的HQ和熊果苷的卉類，仍然在歐洲一些國家使用。HQ的潛在毒性取決于接觸途徑，嚙齒類毒性有很高的性別差異和種群差異。在實(shí)驗(yàn)動物發(fā)現(xiàn)有腎毒性，皮膚毒性研究未顯示有全身毒性反應(yīng)，在鼠和兔的發(fā)育和生殖研究中尚無有意義的結(jié)果，對人類的致癌性活體研究尚無資料證實(shí)。在非洲的東南部，皮質(zhì)類固醇作為褪色劑使用是常見的，常常引起類固醇的毒副作用及撤退性皮炎。最新的一種脫色劑就是曲酸，有效性和安全性有待深入研究。
藥物在美容領(lǐng)域里有著廣泛的應(yīng)用，中藥、西藥和中西藥結(jié)合的方法近年來在痤瘡、黃褐斑、增生性瘢痕、扁平疣、斑禿、硬皮病、復(fù)發(fā)性口瘡等損容性疾病的治療中呈現(xiàn)明顯的效果。
3 美容皮膚科學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)中的價(jià)值
美容醫(yī)學(xué)發(fā)展的意義與作用已超越了傳統(tǒng)的健康概念，通過美容手術(shù)達(dá)到外形的改善與增加美感，它是醫(yī)學(xué)與美學(xué)，科學(xué)與藝術(shù)的結(jié)合。它完全順應(yīng)了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)服務(wù)模式的轉(zhuǎn)變，即由單純的生物醫(yī)學(xué)模式向生物、心理、社會醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變。
美容皮膚科學(xué)的醫(yī)學(xué)價(jià)值在于改善損容性皮膚病對人的心理、容貌和形體美的影響，把驅(qū)除疾病、調(diào)整皮膚的機(jī)能與結(jié)構(gòu)、提高心理素質(zhì)，達(dá)到維護(hù)、改善、修復(fù)和再塑人體皮膚之健美，增進(jìn)人的生命活力美感，提高生命質(zhì)量作為主要實(shí)施目標(biāo)。臨床中，需要我們進(jìn)一步科學(xué)地借鑒各相關(guān)學(xué)科的知識和技能手段，諸如美容外科、人體皮膚美學(xué)、心理學(xué)、倫理學(xué)、行為學(xué)、物理學(xué)以及現(xiàn)代激光、藥物代謂學(xué)與化學(xué)美容護(hù)理與保健、醫(yī)學(xué)生物工程、藝術(shù)造型等相關(guān)學(xué)科的知識和技能，不斷豐富、發(fā)展和完善美容皮膚科學(xué)。相信隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和社會人群審美的需要，美容皮膚科學(xué)將會“與時俱進(jìn)”，不斷擴(kuò)展。
4 美容皮膚科學(xué)前景廣闊，任重道遠(yuǎn)
美麗的容顏和健美的體態(tài)是人們追求的目標(biāo)，美容美體是人類進(jìn)化的產(chǎn)物，是生產(chǎn)力發(fā)展、社會文明的標(biāo)志。隨著社會的發(fā)展、生活水平的提高，人們對美的要求越來越迫切和強(qiáng)烈，對美容皮膚醫(yī)學(xué)提出了更高的要求。醫(yī)學(xué)美容正面臨著巨大的發(fā)展機(jī)遇。
皮膚老化是自然老化與環(huán)境誘導(dǎo)過程的老化結(jié)合。自然老化是生命過程中的必然規(guī)律，但是在一定條件下我們可以延緩衰老的發(fā)生，主要是進(jìn)行抗氧化治療。光老化是指在長期日光照射下，引起皮膚外觀、結(jié)構(gòu)及功能改變的老化。而日光中的紫外線與皮膚光老化的發(fā)生密切相關(guān)。陽光照射產(chǎn)生急性和慢性的損傷，紫外線(UV)照射產(chǎn)生免疫抑制現(xiàn)象，這個現(xiàn)象已引起不同學(xué)科的關(guān)注，如：皮膚病學(xué)、免疫學(xué)、光生物學(xué)。盡管發(fā)生機(jī)制一直在爭論，uV的免疫抑制形成皮膚惡性腫瘤(黑素瘤和非黑素瘤)的事實(shí)不能回避。
